بررسی تکثیر ژن های VH و VL از منبع RNA تک پلاسماسل انسانی

توجه : به همراه فایل word این محصول فایل پاورپوینت (PowerPoint) و اسلاید های آن به صورت هدیه ارائه خواهد شد

 بررسی تکثیر ژن های VH و VL از منبع RNA تک پلاسماسل انسانی دارای ۹ صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است

فایل ورد بررسی تکثیر ژن های VH و VL از منبع RNA تک پلاسماسل انسانی  کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه  و مراکز دولتی می باشد.

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی بررسی تکثیر ژن های VH و VL از منبع RNA تک پلاسماسل انسانی،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد

بخشی از متن بررسی تکثیر ژن های VH و VL از منبع RNA تک پلاسماسل انسانی :

نام کنفرانس، همایش یا نشریه : فیزیولوژی و تکوین جانوری (علوم زیستی)

تعداد صفحات :۹

مقدمه و هدف: نخستین نسل آنتی بادی های درمانی منوکلونال با منشا موشی موجب بر انگیختن پاسخ ایمونولوژیکی در بدن انسان می شود. استفاده از آنتی بادی درمانی کاملا انسانی علاوه بر کاهش ایمونوژنیسیته، بیشترین کارایی را به دنبال خواهد داشت. امروزه جهت تهیه آنتی بادی انسانی تکنیک های نمایش فاژی و روش های مبتنی بر تک سلول B، مورد توجه قرار گرفته است. هدف از این پژوهش تکثیر ژن های VH و VL از منبع RNA پلاسماسل انسانی می باشد.روش کار: از واکنش RT-PCR به منظور جداسازی و تکثیر قطعات ژن VH و VL از تک پلاسماسل غربالگری شده علیه آنتی ژن مورد نظر استفاده شد. در ابتدا با استفاده از بافر لیز کننده سلول، پلاسماسل ها لیز و جهت ساخت cDNA استفاده گردیدند. ژن های آنتی بادی انسانی با استفاده از cDNA حاصل از یک پلاسماسل و مجموعه پرایمرهای آنتی بادی تکثیر و شش جفت پرایمر جهت تکثیر نواحی متغیر زنجیره سنگین (VH) و سبک (VL) مورد استفاده قرار گرفتند. در این پرایمرها جایگاه برش آنزیم های محدودالاثر جهت کلون نمودن در وکتور مربوطه و توالی لینکر جهت اتصال نواحی VH و VL قرار داده شد.یافته ها: الکتروفورز طی واکنشPCR مشخص نموده که قطعات VH و VL به طول حدود ۴۰۰bp به طور جداگانه تکثیر یافته اند. توالی های به دست آمده از ژن های آنتی بادی با سایر توالی های موجود در پایگاه NCBI مشابهت ۹۷ درصدی نشان داد.نتیجه گیری: پرایمرهای مورد استفاده در این پژوهش به گونه ای طراحی شدند که دارای توالی لینکر جهت تهیه ScFv و جایگاه برش آنزیم های NcoI و NotI جهت کلونینگ قطعات VH و VL هستند.

کلید واژه: آنتی بادی مونوکلونال انسانی، ScFv، پلاسماسل