بیان و تخلیص DNA پلیمراز Pfu متعلق به خانواده B


در حال بارگذاری
بیان و تخلیص DNA پلیمراز Pfu متعلق به خانواده B
23 اکتبر 2022
فایل ورد و پاورپوینت
2120
2 بازدید
۷۹,۷۰۰ تومان
خرید

توجه : به همراه فایل word این محصول فایل پاورپوینت (PowerPoint) و اسلاید های آن به صورت هدیه ارائه خواهد شد

 بیان و تخلیص DNA پلیمراز Pfu متعلق به خانواده B دارای ۱۷ صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است

فایل ورد بیان و تخلیص DNA پلیمراز Pfu متعلق به خانواده B  کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه  و مراکز دولتی می باشد.

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی بیان و تخلیص DNA پلیمراز Pfu متعلق به خانواده B،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد

بخشی از متن بیان و تخلیص DNA پلیمراز Pfu متعلق به خانواده B :

نام کنفرانس، همایش یا نشریه : مجله دانشکده پزشکی اصفهان

تعداد صفحات :۱۷

مقدمه: DNA پلیمرازها آنزیم هایی هستند که سنتز مولکول DNA را از دئوکسی ریبونوکئوتیدها بر عهده دارند. این آنزیم ها ابزارهای ضروری در زیست شناسی مولکولی به حساب می آیند. DNA پلیمراز Pfu از یک آرکئوباکتری گرمادوست که در رسوبات دریایی با دمای ۱۰۰-۹۰ درجه سلسیوس زندگی می کند، جدا گردیده است. این آنزیم، خصوصیت اگزونوکلئازی ۳ به ۵ را دارد که باعث اصلاح خطاهای ناشی از همانندسازی DNA می شود.روش ها: در این مطالعه، قطعه کد کننده ژن DNA پلیمراز Pfu در ناقل بیانی pET-b15 کلون گردید. سپس با تغییر شرایط بیان مانند غلظت IPTG (Isopropyl b-D-1-thiogalactopyranoside)، زمان و دمای القا، بیان این آنزیم بهینه شد. در نهایت در شرایط بهینه، پروتئین در مقیاس بالا تهیه و به روشی ساده تخلیص گردید. سپس آنزیم تخلیص شده، جهت بررسی فعالیت در واکنش PCR (Polymerase chain reaction) به کارگرفته شد.یافته ها: کلونی هایی بعد از ترانسفورماسیون پلاسمید نوترکیب ایجاد شد که اکثر آن ها حاوی پلاسمید بودند. بیان آنزیم Pfu باندی را در حدود KD 90 در ژل الکتروفورز SDS-PAGE (Sodium do decyl sulfate- Polyacrylamide gel electrophoresis) نتیجه داد. بیشترین میزان تولید پروتئین با غلظت %۷۵ میلی مولار ماده القا کننده IPTG، دمای ۳۷ درجه سلسیوس و ۳ ساعت پس از القا مشاهده شد.نتیجه گیری: تخلیص پروتئین با به کارگیری روشی جدید بر مبنای پروتکل Desai منجر به ایجاد محصولی شد که در واکنش PCR فعالیتی مشابه با نمونه تجاری داشت.

کلید واژه: DNA پلیمراز وابسته به PCR ،DNA، کلونینگ، pET-b15

  راهنمای خرید:
  • در صورتی که به هر دلیلی موفق به دانلود فایل مورد نظر نشدید با ما تماس بگیرید.