انتقال سازه ژنی حاوی بتاگلوبین و miniLCR به رده های سلولی COS-7 و K562 توسط لنتی ویروس نوترکیب: مقدمه ای برای ژن درمانی بیماران بتا – تالاسمی ماژور

توجه : به همراه فایل word این محصول فایل پاورپوینت (PowerPoint) و اسلاید های آن به صورت هدیه ارائه خواهد شد

 انتقال سازه ژنی حاوی بتاگلوبین و miniLCR به رده های سلولی COS-7 و K562 توسط لنتی ویروس نوترکیب: مقدمه ای برای ژن درمانی بیماران بتا – تالاسمی ماژور دارای ۱۴ صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است

فایل ورد انتقال سازه ژنی حاوی بتاگلوبین و miniLCR به رده های سلولی COS-7 و K562 توسط لنتی ویروس نوترکیب: مقدمه ای برای ژن درمانی بیماران بتا – تالاسمی ماژور  کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه  و مراکز دولتی می باشد.

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی انتقال سازه ژنی حاوی بتاگلوبین و miniLCR به رده های سلولی COS-7 و K562 توسط لنتی ویروس نوترکیب: مقدمه ای برای ژن درمانی بیماران بتا – تالاسمی ماژور،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد

بخشی از متن انتقال سازه ژنی حاوی بتاگلوبین و miniLCR به رده های سلولی COS-7 و K562 توسط لنتی ویروس نوترکیب: مقدمه ای برای ژن درمانی بیماران بتا – تالاسمی ماژور :

نام کنفرانس، همایش یا نشریه : مجله علوم پزشکی مدرس، آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس)

تعداد صفحات :۱۴

هدف: بیماری بتا – تالاسمی در اثر غیاب یا کاهش سنتز زنجیره بتاگلوبین به وجود می آید. یکی از روش های درمانی موثر برای این بیماری ژن درمانی توسط ناقل های ویروسی است. ظرفیت ناقل های لنتی ویروسی حدود ۸ کیلو باز است. با توجه به ظرفیت محدود ناقل های لنتی ویروسی از miniLCR طراحی شده به طول ۶ کیلو باز به جای ناحیه تنظیمی LCR در کنار ژن بتاگلوبین استفاده شد. هدف از این مطالعه ساخت لنتی ویروس های نوترکیب حاوی ژن بتاگلوبین و miniLCR برای انتقال سازه ژنی مورد نظر به سلول های هدف به منظور ژن درمانی بتا – تالاسمی ماژور است. مواد و روش ها: هر یک از قطعات HS2، HS3، (miniLCR) HS4 و ژن بتاگلوبین به همراه نواحی ۵″ UTR و “۳ از DNA ژنومی افراد سالم با روش PCR تکثیر شد. هر یک از آن ها پس از کلونینگ در ناقل pTZ57R/T و ساب کلونینگ در ناقل pBGGT در نهایت در یک ناقل لنتی ویروسی به نام pLenti-Dest ساب کلون شد. طی ترانسفکشن همزمان ناقل نهایی به همراه سه ناقل کمکی (Plp/VSVG، Plp2، Plp1) با لیپوفکتامین ۲۰۰۰ به درون رده سلولی ۲۹۳T، لنتی ویروس های نوترکیب حاوی سازه ژنی مورد نظر تولید و با RT-PCR تایید شدند.نتایج: تیتر این لنتی ویروس های نوترکیب در رده های سلولی COS-7و K562 یکسان بود. MOI بهینه این ویروس ها برای سلولCOS-7 ، ۵ به دست آمد. ترانسداکشن سلول های هدف در حضور پلی برن ۲ برابر شد. سلول های COS-7 ترانسدیوس شده پس از دو هفته انتخاب آنتی بیوتیکی باقی ماندند. DNA این کلونی های باقی مانده استخراج و با روش PCR وارد شدن سازه ژنی ساخته شده تایید شد.نتیجه گیری: لنتی ویروس ها می توانند وسیله ای مناسب برای انتقال سازه ژنی فوق به سلول های هدف در حال تقسیم و آن هایی که تقسیم نمی شود مانند سلول های بنیادی با هدف ژن درمانی بیماری های خونی مانند بتا – تالاسمی باشند. کارایی استفاده از لنتی ویروس ها بیشتر از روش هدف گیری ژنی در ژن درمانی بتا – تالاسمی است. انتظار می رود با استفاده از واحدهای HS2و HS3 و HS4 در mini LCR به جای LCR در کنار ژن بتاگلوبین و نیز انتخاب قطعه HS3 با طول بزرگتر میزان بیان بتاگلوبین را افزایش دهد.

کلید واژه: بتا – تالاسمی، ژن بتاگلوبین، miniLCR ،لنتی ویروس، ژن درمانی