تخلیص و ارزیابی HBeAg نوترکیب به همراه بر چسب هیستیدینی با ساختار فیزیولوژیک طبیعی، به دنبال کلونینگ و بیان آن در E.coli

توجه : به همراه فایل word این محصول فایل پاورپوینت (PowerPoint) و اسلاید های آن به صورت هدیه ارائه خواهد شد

 تخلیص و ارزیابی HBeAg نوترکیب به همراه بر چسب هیستیدینی با ساختار فیزیولوژیک طبیعی، به دنبال کلونینگ و بیان آن در E.coli دارای ۱۶ صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است

فایل ورد تخلیص و ارزیابی HBeAg نوترکیب به همراه بر چسب هیستیدینی با ساختار فیزیولوژیک طبیعی، به دنبال کلونینگ و بیان آن در E.coli  کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه  و مراکز دولتی می باشد.

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی تخلیص و ارزیابی HBeAg نوترکیب به همراه بر چسب هیستیدینی با ساختار فیزیولوژیک طبیعی، به دنبال کلونینگ و بیان آن در E.coli،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد

بخشی از متن تخلیص و ارزیابی HBeAg نوترکیب به همراه بر چسب هیستیدینی با ساختار فیزیولوژیک طبیعی، به دنبال کلونینگ و بیان آن در E.coli :

نام کنفرانس، همایش یا نشریه : فیزیولوژی و فارماکولوژی

تعداد صفحات :۱۶

آلودگی به ویروس هپاتیت (HBV) B یکی از مسایل بهداشت جهانی است به طوری که در حال حاضر حدود ۳۶۰ میلیون نفر در ایران به این ویروس آلوده اند. در میان آنتی ژنهای این ویروس، عملکرد فیزیولوژیک HBeAg مثبت حضور این آنتی ژن بعنوان مارکر تکثیر ویروس در نظر گرفته می شود و احتمالا در پاتوژنز و پایداری بیماری نقش دارد در حالیکه در بیماران HBeAg منفی، تفاوت قابل ملاحظه ای در سیر بالینی بیماری مشاهده نشده است. در حال حاضر دسترسی به مقادیر زیاد این آنتی ژن جهت کاربردهای تحقیقی و تشخیصی با استفاده از بیان این آنتی ژن بصورت نوترکیب در سیستمهای بیانی مختلف، مسیر گشته است. در تحقیق حاضر با هدف تولید HBeAg نوترکیب به همراه برچسب هیستیدینی، بخشی از ژن HBeAg که دقیقا مطابق با توالی کد کننده آنتی ژن موجود در خون بیماران مبتلا بود، جداسازی و در وکتور pQE-30 کلون گردید. این وکتور برچسب۶x His را به انتهای آمینی پروتئین مورد نظر متصل می کند. وکتور نوترکیب حاصل جهت تایید صحت ساختار، تحت برش با آنزیمهای محدود کننده قرار گرفت و سپس به سلولهای E.coli M15 ترانسفورم گردیده و جهت بیان پروتیین، القای شیمیایی با IPTG انجام شد. پس از انجام عمل تلخیص، نتایج SDS-PAGE، ELISA و وسترن بلاتینگ نشان داد که HBeAg نوترکیب به دست آمده، خواص کامل آنتی ژنتیک HBeAg که بطور فیزیولوژیک در خون بیماران مشاهده می شود را داراست و افزوده شدن اپی توپهای His-tag نه تنها اثری بر روی این خصوصیات نداشته است بلکه کاربرد این برچسب امکان استفاده از کروماتوگرافی جذبی با Ni-NTAو تخلیص آسان و یک مرحله ای پروتیین را فراهم می کند. این پژوهش یک ساده و کارامد را برای تهیه HBeAg نوترکیب به میزان زیاد و خلوص بالا برای کاربرد های تشخیصی و تحقیقی در باب فیزیولوژی و پاتوژنز این آنتی ژن معرفی می کند.

کلید واژه: HBeAg نوترکیب، برچسب هیستیدینی، خصوصیات فیزیولوژیک HBeAg، کروماتوگرافی جذبی pQE30 ،Ni-NTA