دانش رسان |
مرکز علم و دانش کشور مقاله ریزازدیادی گیاه دارویی سرخارگل (Echinacea purpurea L.) با استفاده از قطعات کوتیلدون و هیپوکوتیل
در حال بارگذاری
توجه : به همراه فایل word این محصول فایل پاورپوینت (PowerPoint) و اسلاید های آن به صورت هدیه ارائه خواهد شد
مقاله ریزازدیادی گیاه دارویی سرخارگل (Echinacea purpurea L.) با استفاده از قطعات کوتیلدون و هیپوکوتیل دارای ۱۲ صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است
فایل ورد مقاله ریزازدیادی گیاه دارویی سرخارگل (Echinacea purpurea L.) با استفاده از قطعات کوتیلدون و هیپوکوتیل کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه و مراکز دولتی می باشد.
توجه : در صورت مشاهده بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی مقاله ریزازدیادی گیاه دارویی سرخارگل (Echinacea purpurea L.) با استفاده از قطعات کوتیلدون و هیپوکوتیل،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد
بخشی از متن مقاله ریزازدیادی گیاه دارویی سرخارگل (Echinacea purpurea L.) با استفاده از قطعات کوتیلدون و هیپوکوتیل :
مقدمه
سرخارگل ارغوانی با نام علمی Echinacea purpurea L. هستند. فروش جزئی محصولات این گیاه در آمریکا سالانه
عضو خانواده Asteraceae بوده و به لحاظ جغرافیایی بالغ بر ۱۵۸ میلیون دلار است و در سطح جهانی سالانه
بومی آمریکای شمالی است. تولید کنندگان عمده آن در ۱/۳ میلیون دلار تخمین زده شده است. پژوهشهای اخیر
اروپا، کشورهای آلمان، سویس، هلند، ایتالیا و اسپانیا مؤسسه NAPRALERT، حضور ۲۱۶ ترکیب فعال
۳۱۱
E. purpurea
in vitro
in vitro
مجله پژوهشهای گیاهی (مجله زیست شناسی ایران) جلد ۲۶، شماره ۳، ۱۳۹۲
دارویی در E. purpurea را اثبات کرده است .(۴) سه
گونه از جنس Echinacea که عموماً دارای مصارف
دارویی هستند عبارتند از: ) E. purpurea با مصرف ریشه و قسمتهای هوایی)، E. angustifolia (با مصرف ریشه) و
E. pallida (با مصرف ریشه) .(۱۷) اسیدهای فنولیک،
آلکامیدها ، پلی استیلنها ، گلیکوپروتئینها و پلی ساکاریدها به عنوان ترکیبات فعال بیولوژیکی در گونههای مختلف Echinacea شناسایی شدهاند ۵) و .(۸ به لحاظ دارویی، عقیده بر این است که گیاه سرخارگل میتواند سیستم ایمنی را از طریق تحریک تولید سلولهای T و
تنفس سلولی (خاصیت آنتی اکسیداسیونی) در برابر سلولهای تومورزا، فعال کند .(۵)
برای تحقق بخشیدن به افزایش تقاضا برای این گیاه دارویی مهم، روشها و راهکارهای مختلفی ابداع شده است که شامل تکثیر سریع گیاه در شرایط استریل و به دست آوردن گیاهان سالم و معرفی سریعتر ارقام جدید با صفات مطلوب است .(۱۹) در این خصوص، تکنیکهای
کشت بافت در محیط بسیار ارزشمند هستند.
اندامهای تمایز یافته در کشت بافت، سیستم کارآمدی را برای تولید مواد فیتوشیمیایی گیاه سرخارگل ارائه کرده است. در کل، سلول، کالوس و ریشههای مویی کشت شده
در محیط میتوانند برای مطالعه مسیر بیوسنتزی
مواد فیتوشیمیایی مهم، مورد بهرهبرداری قرار گیرند .(۸)
مطالعات متعددی در زمینه جنبههای مختلف بهینهسازی سیستم کشت بافت سرخارگل وجود دارد. Koroch و
همکاران ۱۰) و (۱۱ کالوسزایی و اندامزایی غیر مستقیم از ریزنمونه برگ E. purpurea و E. pallida را در غلظتهای مختلف نفتالن استیک اسید (NAA) و -۶بنزیل آمینو پورین (BAP) مورد بررسی قرار دادند. در گزارش دیگر، Mechanda و همکاران (۱۴)، باززایی مستقیم ساقه
از قطعات برگی گیاهان بالغ را با استفاده از
هورمونهای NAA و BAP مورد مطالعه قرار دادند. آنها
دریافتند که باززایی در تمامی غلظتهای BAP که در ترکیب با غلظتهای پایین NAA بوده رخ داده و غلظتهای بالاتر NAA نیز کاهش تولید کالوس و عدم باززایی را به دنبال داشته است. باززایی از طریق هورمون TDZ نیز در مورد گیاه سرخارگل در سیستمهای کشت مایع و جامد گزارش شده که هدف، بررسی نقش هورمون TDZ در القاء باززایی و همچنین توسعه ریزازدیادی در شرایط کشت مایع و جامد برای این گیاه بود .(۹)
هدف از تحقیق حاضر که برای اولین بار در کشور اجرا شده است، بهینهسازی شرایط ریزازدیادی و مطالعه تأثیر غلظتهای مختلف هورمونهای اکسین (NAA) و سیتوکنین
(BAP) در میزان کالوسزایی و باززایی گیاه سرخارگل به منظور بررسی پتانسیل نوع ریزنمونههای این گیاه برای مطالعات آتی در زمینه انتقال ژن به این گونه دارویی مهم بود.
مواد و روشها
برای ضد عفونی، ابتدا بذرهای سرخارگل (جمع آوری شده از ناحیه مرکزی ایران) در اتانول ۷۰ درصد بمدت ۲
دقیقه و پس از شستشو با آب مقطر به مدت ۷ دقیقه در محلول کلرید جیوه ۰/۱ (HgCl2) درصد قرار گرفتند. پس از ضد عفونی، بذور ۳ الی ۴ مرتبه با آب مقطر استریل در فواصل زمانی ۵ دقیقهای، تحت شرایط استریل شستشو داده شدند. بذرهای این گیاه روی محیط کشت MS
(۱۶)(Murashige and Skoog medium) حاوی ۳۰ گرم در لیتر ساکارز و ۷ گرم در لیتر آگار با pH برابر ۵/۸ قرار گرفتند. سپس، نمونهها به اتاقک رشد تحت شرایط ۲۵
درجه سانتیگراد و شدت نور ۴۰۰ لوکس و ۱۶ ساعت روشنایی و ۸ ساعت تاریکی منتقل گردیدند. مراحل این تحقیق در آزمایشگاه کشت بافت دانشکده کشاورزی دانشگاه رازی کرمانشاه انجام گرفت. در فاصله زمانی ۱۵ تا
۲۰ روز، گیاهچههایی به طول ۵-۸ سانتیمتر به دست آمدند. گیاهچههای مذکور به زیر لامینار ایرفلو منتقل شده
۳۱۲
مجله پژوهشهای گیاهی (مجله زیست شناسی ایران) جلد ۲۶، شماره ۳، ۱۳۹۲
و سپس ریزنمونه هیپوکوتیل به قطعات ۰/۵-۱ و کوتیلدون باززایی شده (شکل (۲ به طور متناوب تحت شرایط
به قطعات ۱×۱ سانتیمتری برش داده شده و به طور استریل از کالوسها جدا و به محیط کشت MS عاری از
متوسط در هر پتریدیش، ۱۰ عدد ریز نمونه کشت داده هورمون منتقل شدند تا در این محیط به حداکثر رشد خود
شد (هر تکرار شامل ۶ پتریدیش). تمامی تیمارها پس از برسند. فراوانی باززایی نوساقه با شمارش تعداد نوساقه
۱۴ روز در محیط مشابه واکشت شدند. پس از گذشت ۱۰ تولید شده به تعداد ریزنمونه کشت شده در هر پتری دیش
روز از واکشت و ایجاد کالوس، کالوسها به محیط باززایی محاسبه گردید. پس از ۳۵-۲۵ روز، گیاهچههایی با طول
(تولید نوساقه) منتقل شدند (شکل .(۱ میزان کالوسزایی حدود ۱۰ سانتیمتر به دست آمدند. گیاهچههای مذکور به
با شمارش تعداد قطعات کال داده به تعداد کل ریزنمونه- منظور تولید ریشه تحت شرایط استریل به محیط کشت
های کشت شده به دست آمد. کالوسها به مدت ۱۵ روز MS حاوی هورمون اندول بوتیریک اسید IBA) به میزان ۲
در محیطهای باززایی نگه داشته شدند و سپس نوساقههای میلیگرم در لیتر) منتقل شدند (شکل ۳ الف).
شکل -۱ کالوسهای در حال باززایی از ریزنمونه کوتیلدون
الف)
شکل ۲ الف و ب- نمای نزدیکی از نوساقههای تشکیل شده از ریزنمونه کوتیلدون پس از ۵ هفته در محیط باززایی. توجه داشته باشید که پدیده باززایی چندگانه نوساقهها کاملاً قابل تشخیص است.
۳۱۳
مجله پژوهشهای گیاهی (مجله زیست شناسی ایران) جلد ۲۶، شماره ۳، ۱۳۹۲
ب)
شکل – ۳ الف) نوساقههای منتقل شده به محیط MS حاوی هورمون IBA جهت ریشهدار شدن. ب) انتقال گیاهچهها به گلدانهای بزرگ جهت رشد و سازگاری بیشتر به محیط آزمایشگاه
سرانجام، پس از گذشت ۴-۶ هفته، گیاهان ریشه دارشده به آرامی از شیشه خارج شده و در زیر شیر آب شستشو داده شدند تا هیچ گونه آگار و بقایای محیط کشت روی آنها باقی نماند و سپس به گلدانهایی به قطر ۱۰ سانتیمتر شامل ماسه، پرلایت و خاک (به صورت استریل) منتقل شده و در شرایط کنترل شده از نظر میزان رطوبت و حرارت نگهداری شدند (شکل ۳ ب). قابل ذکر است که در چند روز اول میبایست مقدار رطوبت نسبی محفظه بالا نگه داشته شود ۸۰-۹۰) درصد) و از آب مقطر استریل جهت آبیاری گلدانها، استفاده گردد.
محیط کالوسزایی و باززایی شامل ترکیبات مختلف هورمون -۶ بنزیل آمینوپورین ۰ ;BAP)، ۰/۲، ۰/۴، ۱/۲ و ۲/۴ میلیگرم در لیتر) هر کدام در سه سطح (برای هر یک از آزمایشات) و هورمون نفتالین استیک اسید ۰ ;NAA)، ۰/۰۵، ۰/۱، ۰/۳ و ۰/۶ میلیگرم در لیتر) هر کدام در سه سطح (برای هر یک از آزمایشات) به عنوان عاملهای اول و دوم و نوع ریزنمونه (هیپوکوتیل و کوتیلدون) به عنوان عامل سوم بود. این تحقیق به صورت آزمایش فاکتوریل در قالب طرح کاملاً تصادفی با ۳ تکرار اجراء گردید. تجزیه و
تحلیل آماری دادهها با استفاده از نرم افزارهای SPSS و MSTAT-C انجام شد. قبل از انجام تجزیه واریانس نرمال بودن دادهها مورد بررسی قرار گرفت و تبدیل دادهها
(Arcsin X) انجام شد. برای انجام آزمون مقایسات میانگین نیز از آزمون چند دامنهای دانکن استفاده شد.
اشتراک‌گذاری:
- در صورتی که به هر دلیلی موفق به دانلود فایل مورد نظر نشدید با ما تماس بگیرید.
