مقاله اثر جهشهای نقطهای بر ویژگیهای ساختاری و کاتالیتیک آنزیم پراکسیداز نوترکیب (HRP)

توجه : به همراه فایل word این محصول فایل پاورپوینت (PowerPoint) و اسلاید های آن به صورت هدیه ارائه خواهد شد

  مقاله اثر جهشهای نقطهای بر ویژگیهای ساختاری و کاتالیتیک آنزیم پراکسیداز نوترکیب (HRP) دارای ۸ صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است

فایل ورد مقاله اثر جهشهای نقطهای بر ویژگیهای ساختاری و کاتالیتیک آنزیم پراکسیداز نوترکیب (HRP)  کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه  و مراکز دولتی می باشد.

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی مقاله اثر جهشهای نقطهای بر ویژگیهای ساختاری و کاتالیتیک آنزیم پراکسیداز نوترکیب (HRP)،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد

بخشی از متن مقاله اثر جهشهای نقطهای بر ویژگیهای ساختاری و کاتالیتیک آنزیم پراکسیداز نوترکیب (HRP) :

تعداد صفحات:۸

چکیده:

در زمینههای مختلف بیوتکنولوژی از جمله کیتهای تشخیصی، بیوسنسورها و (HRP) آنزیم پراکسیداز ترب سیاه کوهی بیوکاتالیستها کاربرد فراوانی دارد و به همین دلیل همواره موضوع تحقیقات گسترده بوده است. افزایش کارایی کاتالیتیک وپایداری آنزیم دامنهی کاربردهای آن را گسترش میدهد. امروزه این آنزیم برای مصارف تجاری از ریشهی گیاه ترب سیاه کوهی استخراج میشود. استفاده از میزبان هترولوگ برای کاهش قیمت هزینهها و سهولت تولید و تخلیص آنزیمهایی بادر میزبان هترولوگ و بویژه میزبان HRP کاربردهای گسترده ضروری بهنظر میرسد. از مشکلاتی که بر سر راه بیان پروکاریوتی وجود دارد، عدم گلیکوزیلاسیون میباشد که بر پایداری آنزیم در مقابل دما و پراکسید هیدروژن اثر میگذارد. در این پژوهش دو رزیدوی آسپاراژین در جایگاههای ۲۶۸ و ۱۳ ، که از نقاط گلیکوزیلاسیون در آنزیم وحشی محسوب میشوندبرای جهشزایی انتخاب شدند. این دو رزیدو بهترتیب با ۸۳ % و ۶۵ % دردسترسپذیری سطحی با آسپارتیک اسید جایگزین شدند. هر دو جهشیافته که در میزبان اشریشیاکولی بیان شدند، افزایش پایداری در مقابل دما ( افزایش در نیمهعمر از ۲۰ دقیقه در آنزیم نوترکیب بدون جهش تا ۳۲ و ۶۷ دقیقه در جهشیافتههای جایگاه ۱۳ و ۲۶۸ ) و پراکسید هیدروژن (تا سه و kcat برابر) را نشان دادند. علیرغم فاصلهی دور هر دو رزیدو از جایگاه فعال، تغییرات قابل توجهی در پارامترهای سینتیکیمشاهده شد. مطالعات فلوریمتری و فروکش فلورسانس توسط اکریلامید، تغییر چندانی در انعطافپذیری ساختار پروتئین Km گواه بر اتصال کمتر این ترکیب به پاکتهای هیدروفوبی در نمونههای جهشیافته بود. ،ANS نشان ندادند ولی بررسی اتصالایجاد جهشیافتهی دوگانه، اثر افزایندهی هر دو جهش را نداشت.