بررسی عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از مایکوپلاسما مایکوئیدیس واریته مایکوئیدس و مایکوپلاسما کاپری کولوم واریته کاپری کولوم در گوساله ها و
توجه : به همراه فایل word این محصول فایل پاورپوینت (PowerPoint) و اسلاید های آن به صورت هدیه ارائه خواهد شد
بررسی عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از مایکوپلاسما مایکوئیدیس واریته مایکوئیدس و مایکوپلاسما کاپری کولوم واریته کاپری کولوم در گوساله ها و دارای ۱۸۵ صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است
فایل ورد بررسی عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از مایکوپلاسما مایکوئیدیس واریته مایکوئیدس و مایکوپلاسما کاپری کولوم واریته کاپری کولوم در گوساله ها و کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه و مراکز دولتی می باشد.
این پروژه توسط مرکز بررسی عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از مایکوپلاسما مایکوئیدیس واریته مایکوئیدس و مایکوپلاسما کاپری کولوم واریته کاپری کولوم در گوساله ها و۲ ارائه میگردد
توجه : در صورت مشاهده بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی بررسی عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از مایکوپلاسما مایکوئیدیس واریته مایکوئیدس و مایکوپلاسما کاپری کولوم واریته کاپری کولوم در گوساله ها و،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد
بخشی از متن بررسی عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از مایکوپلاسما مایکوئیدیس واریته مایکوئیدس و مایکوپلاسما کاپری کولوم واریته کاپری کولوم در گوساله ها و :
بررسی عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از مایکوپلاسما مایکوئیدیس واریته مایکوئیدس و مایکوپلاسما کاپری کولوم واریته کاپری کولوم در گوساله ها و بزها
عنوان کامل
بررسی عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از مایکوپلاسما مایکوئیدس واریته مایکوئیدس و مایکوپلاسما کاپری کولوم واریته کاپری کولوم در گوسالهها و بزهای کشتارشده به روش PCR
مقدمه
عفونت پلوروپنومونی واگیر، بیماری تحلیل برنده تنفسی است که با جای گرفتن در طبقهبندی بیماریهای سازمان جهانی کنترل بیماریهای واگیر، لزوم و اهمیت شناسایی آن مشخص شده است. عامل اصلی این بیماری، گونه مایکوپلاسما مایکوئیدس میباشد که تایپ کلونی کوچک آن[۱] بطور اختصاصی به گلههای گاو، خسارات فراوانی ناشی از همهگیری گسترده و مرگ و میر فراوان تحمیل کرده است.
[۱]- Mycoplsma mycoides mycoides biotype Small Colony (MmmSC)
چکیده :
کلاستر مایکوپلاسما مایکوئیدس در برگیرنده مهمترین پاتوژنهای تنفسی نشخوارکنندگان است که سالیانه، خسارات اقتصادی سنگینی بر صنعت دامپروری کشورهای جهان وارد میکند. اخیرا شیوعهای بازپدیدی از عفونتهای پلوروپنومونی نشخوارکنندگان در منطقه خاورمیانه گزارش شده است. در این شرایط تعیین وضعیت گلههای کشور از نظر آلودگی به گونههای پاتوژن این کلاستر، از اهمیت خاصی برخوردار است. هنوز گزارشی از شناسایی و جداسازی گونههای درگیر از عفونت پلوروپنومونی در ایران بدست نیامده است. عدم برخورداری از خصوصیت پاتوگونومیک در نمونههای بالینی و دشواریهای فراوان جداسازی میکروارگانیسم، به ضرورت شناسایی و بکارگیری روشهای تشخیصی جایگزین افزوده است.
خصوصیات کلی مایکوپلاسما
مایکوپلاسماها، جزو کوچکترین پروکاریوتهایند (μm15-0) که قادرند از فیلترهای مخصوص باکتری (μm45-22/0) عبور کنند. این اجرام به دلیل فقدان دیواره سلولی، اشکال پلیمورفیک دارند و به اشکال کروی (μm3/0-9/0)، رشتهای (تا μm1)،گلابی شکل، شاخهای و مارپیچی در زیر میکروسکوپ الکترونی دیده میشوند. در واقع، بیشتر شبیه به فرم L باکتریها می باشند.ارگانیسم از سه ارگانل شامل غشا سلولی، ریبوزوم و مولکول حلقوی DNA تشکیل شده است. تصویر مایکوپلاسما در زیر میکروسکوپ الکترونی، شبیه فیلامان (بطری) است که از دو انتها طویل شده است. این اندامکهای انتهایی[۱]، محل اتصال به غشا یوکاریوت است که دارای یک ساختمان مرکزی میله مانند[۲] میباشد و توسط غشا احاطه شده است (۷۰).
[۱]- Tip organelle
[۲]- Rod like
مقاومت مایکوپلاسماها
این اجرام توانایی تولید دیواره سلولی پلیمورفیک و پپتیدوگلیکانی را دارند و از همین رو، به آنها باکتریهایی با نقص دیواره سلولی[۱] اطلاق میشود. آنتیبیوتیکهایی که بر روی دیواره سلولی اثر میکنند،(دسته بتالاکتامز) مانند پنیسیلین و سفالوسپورین، آنها را از بین نمیبرند.
[۱]- cell wall deficients ) CWDs)
طبقهبندی کلاستر مایکوئیدس
اعضا این کلاستر شامل مایکوپلاسما مایکوئیدس مایکوئیدس کلونی کوچک (MmmSC)، مایکوپلاسما مایکوئیدس مایکوئیدس کلونی بزرگ (MmmLC)، مایکوپلاسما کاپریکولوم کاپریپنومونی (Mccp)، مایکوپلاسما کاپریکولوم کاپریکولوم (Mcc)، مایکوپلاسما مایکوئیدس کاپری (Mmc)، سروتیپ ۷ سویه گاوی (M.bsg7)، مایکوپلاسما پوتریفیکنس (M.putrificans)، مایکوپلاسما کووتی (M.cowetti) و مایکوپلاسما یستی (M.yeasti) میباشند. دو گونه آخر جز مایکوپلاسماهای ساپروفیت اند که بیماریزایی آنها در شرایط عادی در نشخوارکنندگان نامعلوم است و پوتریفیکنس از مبتلایان به سندروم نقص ایمنی انسان نیز جدا شده است (۴۷).
فاکتور حدت
علیرغم مطالعات گسترده در این زمینه، مکانیسم بیماریزایی MmmSC هنوز ناشناخته است. به هر حال، تئوریهایی وجود دارند که به صورت تجربی مورد آزمایش قرار گرفتهاند. در سال ۱۹۷۶، نشان داده شد که تزریق داخل وریدی کپسول MmmSC به گوسالهها، موجب ادم ریوی در مبتلایان به CBPP میشود. از این رو، عنوان شده است که اثرات سمی کپسول برروی دیواره رگها ،بصورت مستقیم است (۴۳).
کشت و رشد گونه کاپری کولوم
محیطی که به وسیله مک اون و مینت برای کشت Mccp استفاده گردید، به نام محیط[۱] VFG نامیده شد که شامل محیط کشتی مایع از عصاره کبد و سرم بز است. از محیطهای جایگزین مناسب میتوان از محیط WJ، محیط Hay Flick اصلاح شده، محیط تریپتوز نوینگ نام برد (۹).
[۱]- Viande foie goat
اختصاصیت میزبان
در شرایط طبیعی، بیماری CBPP در گاوهایی از گونه گاوسانان اتفاق میافتد، همچنین بیماری در بوفالو، یاک، بیسون و حتی گوزن،دیده شده است. حساسیت طبیعی گاوها بین نژادهای متعدد و افراد یک جمعیت متفاوت است. گاوهای جوان تا زیر ۳ سال ،نسبت به گاوهای مسن مقاومترند. به نظر میرسد که نژاد BOS نسبت به سایر نژادها، به بیماری حساستر باشد. علاوه بر این، نژادهای اروپایی نسبت به نژادهای آفریقایی حساستربنظر میرسند. بهبودی پس از بیماری، منجر به مصونیت همیشگی میشود.
بررسی عفونت ریوی مایکوپلاسمایی ناشی از مایکوپلاسما مایکوئیدیس واریته مایکوئیدس و مایکوپلاسما کاپری کولوم واریته کاپری کولوم در گوساله ها و
فهرست
عنوان صفحه
الف- مقدمه………………………………………. ۱
ب-چکیده ۳
فصل اول:کلیات …………………………………… ۵
۱- تاریخچه …………………………………… ۶
۲- خصوصیات کلی مایکوپلاسما………………………….. ۶
۳- مقاومت مایکوپلاسماها……………………………. ۸
۴- طبقه بندی مایکوپلاسماها…………………………. ۹
۵- طبقه بندی کلاستر مایکوئیدس………………………. ۱۲
۶- فیلوژنی……………………………………… . ۱۴
۷- ساختمان …………………………………….. ۱۵
۱-۷-ساختمان مایکوپلاسما مایکوئیدس ……………………. ۱۵
۲-۷- ساختمان مایکوپلاسما کاپری کولوم ………………… ۱۷
۸- بیولوژی مولکولی……………………………….. ۱۹
۹- توالیهای تکراری……………………………….. ۲۳
۱۰- پروتئینهای سطحی………………………………. ۲۵
۱۱- فاکتور حدت…………………………………… ۳۰
۱۲- آنالیز پروتئین ……………………………… ۳۲
۱۳- طبقه بندی سویهها …………………………….. ۳۴
۱۴- مشخصات گونه مایکوئیدس…………………………. ۳۵
۱۵- کشت و رشد گونه مایکوئیدس ………………………. ۳۸
۱۶- کشت و رشد گونه کاپری کولوم …………………….. ۴۱
۱-۱۶- محیط Thiacourt ……………………………… 41
۱۷- بیماری پلوروپنومونی واگیر گاوان…………………. ۴۴
۱-۱۷- علائم بالینی ……………………………….. ۴۵
۲-۱۷- علائم کالبدگشایی بیماری ………………………. ۴۷
۳-۱۷- پاتوژنز …………………………………… ۵۰
۱-۳-۱۷- مکانیسمهای مقابله با دستگاه ایمنی……………. ۵۳
۴-۱۷- اختصاصیت میزبان…………………………….. ۵۷
۵-۱۷- انتقال بیماری …………………………….. ۵۸
۶-۱۷- سیر همه گیری ……………………………….. ۵۹
۱-۶-۱۷- مخزن…………………………………….. ۵۹
۲-۶-۱۷- راه انتقال……………………………….. ۵۹
۷-۱۷- پیشگیری و کنترل…………………………….. ۶۰
۱-۷-۱۷- اقدامات لازم برای حفاظت مناطق عاری از بیماری…… ۶۱
۲-۷-۱۷- اقدامات لازم هنگام شیوع بیماری……………….. ۶۲
۳-۷-۱۷- اقدامات لازم در مناطق آلوده بومی……………… ۶۳
۱۸- بیماری پلوروپنومونی واگیر بزان …………………. ۶۳
۱-۱۸- علائم بالینی ……………………………….. ۶۴
۲-۱۸- علائم کالبد گشایی……………………………. ۶۶
۱۹- گونه مایکوپلاسما کاپریکولوم کاپریکولوم……………. ۶۹
۱-۱۹- سندروم MASKePs……………………………… 70
۲-۱۹- علائم بالینی………………………………… ۷۱
۳-۱۹- علائم کالبد گشایی……………………………. ۷۱
۴-۱۹- سندروم آگالاکتیه واگیر……………………….. ۷۳
۲۰- گونه مایکوپلاسما کاپری ………………………… ۷۳
۱-۲۰- بیماریزایی ………………………………… ۷۳
۲-۲۰- علائم کالبد گشایی……………………………. ۷۴
۲۱- سیر همهگیری………………………………… ۷۵
۱-۲۱-مخزن……………………………………… .. ۷۵
۲-۲۱-راه انتقال…………………………………. ۷۶
۳-۲۱-جمعیت میزبان……………………………….. ۷۷
۲۲-پیشگیری وکنترل ………………………………. ۷۷
۱-۲۲- اقدامات لازم برای محافظت مناطق عاری از بیماری…… ۷۷
۲-۲۲- اقدامات لازم هنگام شیوع بیماری……………….. ۷۸
۳-۲۲- اقدامات لازم در مناطق آلوده بومی………………. ۷۸
۲۳-واکسن………………………………………. ۷۹
۱-۲۳-واکسن MmmLC ……………………………… 79
۲-۲۳-واکسن Mccp ………………………………… 79
۳-۲۳-واکسن Mcc ………………………………… 79 79-اختصاصیت میزبان در کلاستر مایکوئیدس ……………… ……… ۸۰
۲۵-تشخیص افتراقی………………………………… ۸۰
۱-۲۵-شناسایی عامل بیماری زا ……………………… .. ۸۱
۱-۱-۲۵-بررسی میکروسکوپیک اگزودای ریه از طریق تهیه اسمیر یا برش بافتی ۸۱
۲-۲۵- تشخیص آزمایشگاهی ………………………….. ۸۱
۱-۲-۲۵- روش کشت و جداسازی………………………… ۸۱
۱-۱-۲-۲۵- انتخاب نمونه ها ………………………….. ۸۲
۲-۱-۲-۲۵- آماده سازی نمونه ها …………………….. ۸۲
۳-۲۵- تستهای بیوشیمی…………………………….. ۸۳
۴-۲۵- روشهای سرولوژی…………………………….. ۸۵
۱-۴-۲۵- عوامل موثر در آزمایشات سرولوژی ……………….. ۸۵
۲-۴-۲۵- تست مهاری رشد …………………………….. ۸۷
۳-۴-۲۵- تست ایمونو فلورسانس ………………………… ۸۸
۴-۴-۲۵- تست رسوب ژلی…………………………….. .. ۸۸
۵-۴-۲۵- تست فیکساسیون کامپلمان ………………………. ۸۹
۶-۴-۲۵- تست ممانعت از هماگلوتیناسیون …………………. ۸۹
۷-۴-۲۵- تست آگلوتیناسیون لاتکس…………………….. ۹۰
۸-۴-۲۵- تست الیزای رقابتی………………………… ۹۱
۹-۴-۲۵- سایر تستهای تشخیصی……………………….. ۹۴
۵-۲۵ – مشکلات روشهای سنتی…………………………. ۹۴
۶-۲۵- تشخیص با استفاده از PCR…………………….. 95
فصل دوم: روش کار
۲۶- روش کار ……………………………………. ۱۰۱
۱-۲۶- جمع آوری نمونه ………………………………. ۱۰۱
۱-۱-۲۶- مواد لازم…………………………………… ۱۰۱
۲-۱-۲۶- بخش جمع آوری نمونه……………………….. ۱۰۱
۳-۱-۲۶- نمونه برداری ……………………………. ۱۰۳
۲-۲۶- کشت و جداسازی نمونه ها………………………. ۱۰۴
۱-۲-۲۶- مواد لازم ……………………………….. ۱۰۴
۲-۲-۲۶- طرز تهیه محیط کشت اختصاصی برای جداسازی مایکوپلاسمای نشخوار کنندگان ۱۰۶
۱-۲-۲-۲۶- مواد لازم ……………………………… ۱۰۶
۲-۲-۲-۲۶- روش تهیه محیط کشت…………………………. ۱۰۷
۳-۲۶- استخراج DNA مایکوپلاسما……………………… ۱۰۹
۱-۳-۲۶- روش استخراج DNA از نمونه های ارسالی…………… ۱۰۹
۴-۲۶- فرایند PCR ……………………………….. 110
۱-۴-۲۶- مواد لازم ……………………………….. ۱۱۰
۲-۴-۲۶- آماده سازی مواد جهت واکنش PCR ……………….. 112
۱-۲-۴-۲۶- افزوده سازی DNA نمونهها ………………… ۱۱۲
۲-۲-۴-۲۶- افزوده سازی DNA کلونیهای جدا شده………….. ۱۱۵
۳-۲-۴-۲۶- تهیه مخلوط اصلی اولیه……………………. ۱۱۵
۳-۴-۲۶- پرایمرها………………………………… ۱۱۵
۴-۲۶- واکنش PCR………………………………… 117
۵-۲۶- تهیه ژل الکتروفورز ………………………… ۱۱۸
۱-۵-۲۶- طرز تهیه محلول اتیدیوم برماید ………………… ۱۱۹
۶-۲۶- الکتروفورز ………………………………….. ۱۲۱
۷-۲۶- رویت باندهای ایجاد شده …………………….. ۱۲۲
فصل سوم: نتایج
۲۷- نتایج ……………………………………… .. ۱۲۴
۱-۲۷- جداسازی…………………………………… ۱۲۴
۱-۱-۲۷- بررسی عملکرد محیط کشت……………………… ۱۲۴
۲-۱-۲۷- نتایج کشت نمونه های ارسالی ………………… ۱۲۴
۱-۲-۱-۲۷- نتایج روز پنجم ………………………… ۱۲۵
۲-۲-۱-۲۷- نتایج روزهفتم تا دهم…………………….. ۱۲۵
۳-۲-۱-۲۷- نتایج روزپانزدهم……………………….. ۱۲۶
۲-۲۷- نتایج PCR ………………………………… 126
۱-۲-۲۷- نتایج PCR نمونه ها با پرایمر جنس ………….. ۱۲۶
۲-۲-۲۷- تائید کلونی های جدا شده……………………. ۱۲۷
۳-۲-۲۷- نتایج PCR نمونه ها با پرایمر کلاستر مایکوئیدس… ۱۲۷
۴-۲-۲۷- نتایج PCR نمونه ها با پرایمر گونه آگالاکتیه….. ۱۲۸
۵-۲-۲۷- نتایج PCR نمونه ها با پرایمر گونه مایکوئیدس کلونی بزرگ ۱۲۹
۳-۲۷- نتایج کالبد گشایی………………………….. ۱۳۰
۱-۳-۲۷- معیار انتخاب ……………………………. ۱۳۰
فصل چهارم: بررسی نتایج
نمودارها…………………………………………. ۱۳۱
فصل پنجم: بحث
۲۸- بحث ………………………………………. ۱۳۹
۱-۲۸- ضایعات کالبد گشایی……………………………. ۱۳۹
۲-۲۸- میزان وقوع عفونت تنفسی مایکوپلاسما ……………. ۱۴۱
۳-۲۸- روش کشت…………………………………… ۱۴۲
۴-۲۸- روش PCR ………………………………… 147
۵-۲۸- فراوانی گونه ها …………………………… ۱۵۲
۲۹- خلاصه انگلیسی………………………………… ۱۵۹
۳۰- منابع ……………………………………… .. ۱۶۰
- در صورتی که به هر دلیلی موفق به دانلود فایل مورد نظر نشدید با ما تماس بگیرید.