تولید لنتی ویروس های نوترکیب بیان کننده miR-16 توسط ترانسفکشن موقت سلول های ۲۹۳T

توجه : به همراه فایل word این محصول فایل پاورپوینت (PowerPoint) و اسلاید های آن به صورت هدیه ارائه خواهد شد

 تولید لنتی ویروس های نوترکیب بیان کننده miR-16 توسط ترانسفکشن موقت سلول های ۲۹۳T دارای ۱۶ صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است

فایل ورد تولید لنتی ویروس های نوترکیب بیان کننده miR-16 توسط ترانسفکشن موقت سلول های ۲۹۳T  کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه  و مراکز دولتی می باشد.

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی تولید لنتی ویروس های نوترکیب بیان کننده miR-16 توسط ترانسفکشن موقت سلول های ۲۹۳T،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد

بخشی از متن تولید لنتی ویروس های نوترکیب بیان کننده miR-16 توسط ترانسفکشن موقت سلول های ۲۹۳T :

نام کنفرانس، همایش یا نشریه : مجله علوم پزشکی مدرس، آسیب شناسی زیستی (علوم پزشکی مدرس)

تعداد صفحات :۱۶

هدف: هدف از این مطالعه تولید لنتی ویروس های بیان کننده miR-16 است. پس از ترانسداکشن، تغییرات ایجاد شده در سطوح بیانی این miRNA و پروتئین هدف آن ارزیابی خواهد شد.مواد و روش ها: قطعه ژنی حاوی توالی پیش ساز miR-16 در پلاسمید لنتی ویروسی کلون شد. سازه نوترکیب همراه با پلاسمید های کدکننده پروتئین های ساختاری و پوششی ویروس توسط کلسیم-فسفات به رده سلولی ۲۹۳T ترانسفکت شد. سوپ سلولی جمع آوری و ذرات ویروسی توسط اولتراسانترفیوژ رسوب داده شد و تعیین تیتر ویروس توسط میکروسکوپ فلورسانت و روش فلوسایتومتری انجام یافت. تغییرات در سطوح بیانی miR-16 و پروتئین هدف آن به ترتیب توسط روش های Real-time PCR و لکه گذاری وسترن ارزیابی شد.نتایج: تایید حضور ژن در پلاسمید و درستی توالی آن توسط کلونی – PCR، هضم آنزیمی کلون های مثبت و توالی یابی انجام شد. پس از ترانسفکشن همزمان سلول های ۲۹۳T با پلاسمید لنتی – miR و پلاسمید های ساختاری و پوششی ویروس و تعیین تیتر ذرات ویروسی تغلیظ شده، سلول های مورد نظر با لنتی ویروس نوترکیب آلوده شدند. بیشینه بیان GFP در بیش از ۸۰ درصد سلول های آلوده شده با لنتی ویروس در MOI=1 حاصل شد. بررسی سطوح بیانی miR-16 توسط Real-time PCR نشان داد که بیان این میکرو RNA در سلول های آلوده شده با لنتی ویروس واجد miR-16 در مقایسه با گروه کنترل افزایش محسوسی دارد. تجزیه و تحلیل لکه گذاری وسترن نیز نشان داد بیش بیان miR-16 سبب کاهش بیان پروتئین BCL-2 می شود.نتیجه گیری: سیستم بیانی لنتی ویروسی ارایه شده می تواند به عنوان ابزاری در راستای تحویل رسانی موثر مقلدهای میکرو RNA به سلول پیشنهاد شود.

کلید واژه: میکرو RNA، لنتی ویروس، ترانسفکشن، ترانسداکشن