دانش رسان |
مرکز علم و دانش کشور بررسی القا آپوپتوزیز بوسیله وکتور بیان کننده SiRNA در رده سلولی K562 در محیط کشت
در حال بارگذاری
توجه : به همراه فایل word این محصول فایل پاورپوینت (PowerPoint) و اسلاید های آن به صورت هدیه ارائه خواهد شد
بررسی القا آپوپتوزیز بوسیله وکتور بیان کننده SiRNA در رده سلولی K562 در محیط کشت دارای ۱۶ صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است
فایل ورد بررسی القا آپوپتوزیز بوسیله وکتور بیان کننده SiRNA در رده سلولی K562 در محیط کشت کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه و مراکز دولتی می باشد.
توجه : در صورت مشاهده بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی بررسی القا آپوپتوزیز بوسیله وکتور بیان کننده SiRNA در رده سلولی K562 در محیط کشت،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد
بخشی از متن بررسی القا آپوپتوزیز بوسیله وکتور بیان کننده SiRNA در رده سلولی K562 در محیط کشت :
نام کنفرانس، همایش یا نشریه : مجله پزشکی کوثر
تعداد صفحات :۱۶
هدف: هدف از این مطالعه طراحی SiRNA مناسب بر علیه ژن Bcr/Abl و به کار گیری وکتور بیان کننده مناسب(pRNA-H1.1/Neo) ، به منظور بیان آن در رده سلولی سرطان لوکمی K562 و بررسی میزان تاثیر آن از طریق بررسی القا آپوپتوزیز پس از انتقال وکتور به داخل سلول می باشد.روش بررسی: بر اساس توالی mRNA مولکول کایمرای ،Bcr-Abl توالی مناسب انتخاب و پس از طراحی آن به صورت ،ShRNA به DNA بیان کننده ShRNA تبدیل و بداخل وکتور بیان pRNA-H1.1/Neo منتقل شد. سپس صحت عمل کلونینگ، با استفاده ازPCR و تعیین سکانس مورد ارزیابی قرار گرفت. پس از تکثیر وکتور کلون شده با استفاده از لیپوفکتامین بداخل سلول K562 منتقل گردید و کارآیی روش انتقال با استفاده وکتور بیان کننده GFP مورد ارزیابی قرار گرفت. از وکتور اولیه کلون نشده وSiRNA با توالی غیر اختصاصی نیز به عنوان کنترل منفی استفاده شد. پس از انتقال وکتور بداخل سلول بررسی القا آپوپتوزیز و وابستگی آپوپتوزیز به زمان از طریق سنجش میزان آپوپتوزیز در زمان های مختلف با کمک کیت تشخیص آپوپتوزیز و با استفاده از روش الایزا مورد مطالعه قرار گرفت.یافته ها: با استفاده از نتایج حاصل از PCR و هم چنین تعیین سکانس صحت عمل کلونینگ مورد تایید قرار گرفت. با بیان پروتئین GFP و ظهور رنگ سبز فلورسانس در سلولهای حاوی وکتور، عمل انتقال وکتور میزان کارآیی روش انتقال و بیان وکتور در سلول مورد تایید قرار گرفت کارآیی روش لیپوفکتامین معادل ۴۴% بود. میزان القا آپوپتوزیز در سلولهای K562 آلوده به وکتور کلون شده در مقایسه با سلول های کنترل به میزان قابل توجهی در ۲۴، ۴۸ و ۷۲ ساعت پس از انتقال وکتور افزایش یافت. این افزایش وابسته به زمان بود بطوری که میزان آپوپتوزیز حاصل از غلظت ۰.۸ میکرومولار در سلولهای حاوی وکتور کلون شده پس از ۷۲ ساعت معادل (P<0.0) %(36±۲.۳) بود در حالیکه این میزان در سلولهای حاوی وکتور کنترل، سلول های حاوی کنترل منفی و سلول های نرمال به ترتیب معادل %(۰۵.۵±۰.۲۳) و %(۲.۵±۰.۸۶) ،%(۸.۴±۰.۶) بود. در میزان آپوپتوزیز در سلولهای کنترل با گذشت زمان تغییری مشاهده نشد. در حالیکه در سلول های آلوده با وکتور کلون شده متناسب با زمان میزان آپوپتوزیز نیز بطور معنی داری افزایش نشان می‌دهد. افزایش آپوپتوز با کاهش میزان mRNA ژن Bcr/Abl همراه بود که بیانگر تخریب mRNA توسط SiRNA داخل سلولی و ارتباط آن با آپوپتوزیز است.نتیجه گیری: وکتور بیان کننده SiRNA بر علیه Bcr/Abl بطور موفقیت آمیز کلون شده و نتایج حاصل از مطالعه نشان دهنده بیان داخل سلولی SiRNA توسط این وکتور بود که از طریق کاهش میزان mRNA ژن Bcr/Abl به طور موثری آپوپتوزیز را در سلولهای K562 القا نمود. لذا استفاده از وکتور بیان کننده SiRNA می‌تواند بعنوان یک روش مولکولی جدید به منظور خاموش کردن ژن در درمان سرطان های مختلف بویژه CML مورد توجه قرار گیرد.
کلید واژه: SiRNA ،CML ،pRNA-H1.1/Neo ،Bcr/Abl، آپوپتوزیز
- در صورتی که به هر دلیلی موفق به دانلود فایل مورد نظر نشدید با ما تماس بگیرید.
