بررسی روش های مختلف تشخیص سریع گونه های درماتوفیت با استفاده از روش PCR

توجه : به همراه فایل word این محصول فایل پاورپوینت (PowerPoint) و اسلاید های آن به صورت هدیه ارائه خواهد شد

 بررسی روش های مختلف تشخیص سریع گونه های درماتوفیت با استفاده از روش PCR دارای ۸ صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است

فایل ورد بررسی روش های مختلف تشخیص سریع گونه های درماتوفیت با استفاده از روش PCR  کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه  و مراکز دولتی می باشد.

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی بررسی روش های مختلف تشخیص سریع گونه های درماتوفیت با استفاده از روش PCR،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد

بخشی از متن بررسی روش های مختلف تشخیص سریع گونه های درماتوفیت با استفاده از روش PCR :

نام کنفرانس، همایش یا نشریه : بیماریهای عفونی و گرمسیری ایران

تعداد صفحات :۸

سابقه و هدف: امروزه اهمیت بکار گیری پروتکل های درمانی هدفمند و کارآمد بر علیه آلودگی به گونه های مختلف درماتوفیت ها بر پایه تشخیص سریع و دقیق عامل عفونی احساس می شود. در بسیاری از کشورها از روش های مولکولی متعدد و متنوعی بطور روتین برای تشخیص طیف وسیعی از بیماری های عفونی سود می برند. در کشور ما نیز تعدادی از محققین به صورت پراکنده برای تشخیص درماتوفیت ها، با بهره گیری از روش های مولکولی و کلنی های درماتوفیتی رشد کرده از کشت نمونه های پوسته، اقداماتی را صورت داده اند. در این تحقیق ما برای اولین بار در ایران امکان تشخیص مستقیم و سریع این قارچها را با استفاده از روش PCR در نمونه های پوسته و کلنی کشت ۳ تا ۵ روزه پوسته بیمار مورد ارزیابی قرار دادیم. تا کنون این روش در سطح جهان نیز بصورت محدودی مورد آزمایش قرار گرفته است.روش کار: در مطالعه حاضر به بررسی روش های مختلف برای هموژن کردن بافت پوسته بیمار و تخریب دیواره سلولی قارچ همراه با بهینه سازی شرایط تخلیص DNA با استفاده از روش های متداول و کیت های آماده اقدم شد. به علاوه برای انجام PCR پارامترهای مختلفی نظیر استفاده از چند جفت پرایمر، آنزیم های DNA پلیمراز، تغییر در دماها و زمان های برنامه PCR مورد ارزیابی قرار گرفتند.یافته ها: در این مسیر با موانعی چون دیواره سخت قارچ ها، مقدار کم DNA قارچی نسبت به کل مقدار DNA تخلیص شده، عوامل مهم و متعدد تاثیر گذار در روند تخلیص DNA و پروسه انجام PCR مواجه شده که برای عبور از آنها راه کارهای مختلفی آزمایش گردید. در نهایت با بهینه سازی شرایط تخلیص DNA و استخراج مقدار قابل توجهی DNA قارچ از مخلوط سه نمونه پوسته بیمار (همه از یک جنس درماتوفیت)، جواب PCR مثبت بدست آمد که البته این روش کار قابل توجیه و اجرا بصورت روتین برای تشخیص درماتوفیتوزیس نمی باشد.نتیجه گیری: علی رغم تدابیر اتخاذ شده دراین مطالعه به منظور نهادینه سازی استفاده از روش PCR برای تشخیص سریع درماتوفیت ها در نمونه پوسته بیمار و نتایج مثبتی هم که حاصل گردید، به نظر می رسد که با توجه به محدودیت مقدار پوسته بیماران و وجود ممانعت کننده های بالقوه برای عملکرد DNA پلیمراز در پوسته بهتر است علاوه بر بررسی های تکمیلی و بهینه سازی روش ها، به جای پوسته از کلنی های درماتوفیتی رشد کرده در مراحل اولیه کشت (کلنی های بسیار جوان) استفاده نمود.

کلید واژه: درماتوفیت، PCR، پوسته، تخلیص DNA