ذخیره سازی طولانی سوسپانسیون سلولی چند رقم برنج (.Oryza sative L) ایرانی به عنوان ژرم پلاسم در مافوق سرما

توجه : به همراه فایل word این محصول فایل پاورپوینت (PowerPoint) و اسلاید های آن به صورت هدیه ارائه خواهد شد

 ذخیره سازی طولانی سوسپانسیون سلولی چند رقم برنج (.Oryza sative L) ایرانی به عنوان ژرم پلاسم در مافوق سرما دارای ۱۳ صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است

فایل ورد ذخیره سازی طولانی سوسپانسیون سلولی چند رقم برنج (.Oryza sative L) ایرانی به عنوان ژرم پلاسم در مافوق سرما  کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه  و مراکز دولتی می باشد.

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی ذخیره سازی طولانی سوسپانسیون سلولی چند رقم برنج (.Oryza sative L) ایرانی به عنوان ژرم پلاسم در مافوق سرما،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد

بخشی از متن ذخیره سازی طولانی سوسپانسیون سلولی چند رقم برنج (.Oryza sative L) ایرانی به عنوان ژرم پلاسم در مافوق سرما :

نام کنفرانس، همایش یا نشریه : علوم کشاورزی ایران

تعداد صفحات :۱۳

نگهداری مواد ژنتیکی در مافوق سرما تکنیکی است که در بسیاری از مراکز تحقیقاتی دنیا برای نگهداری ژرم پلاسم گیاهی در مدت زمان طولانی از آن استفاده می نمایند. جهت استفاده این تکنیک در نگهداری ژرم پلاسم برنج، آزمایشی انجام شده تا دریافته شود سوسپانسیون سلولی را حداکثر چه مدت می توان با حفظ باززایی آن در مافوق سرما نگهداری نمود؟ برای این منظور ابتدا در محیط کشت LS2.5 از بذور سه رقم برنج ایرانی (آمل-۳ ، خزر و طارم) کالوس تولید شد. سپس در محیط کشت های مایع AA2 و R2 سوسپانسیون سلولی برای ارقام مختلف تشکیل شد. جهت ذخیره کردن سوسپانسیون سلولی در ازت مایع، سلول ها را در محیط کشت های مایع AA2 و R2 به مدت ۳ الی ۴ روز واکشت نموده سپس ۰.۲ گرم از این سلولها به داخل ظروف کوچک از جنس پولی پروپیلن انتقال داده و همزمان ۰.۷۵ سانتی متر مکعب از مخلوط مواد Glycerol, 46 g/l; DMSO, 39 g/l pH 5.8; Sucrose, 342.3 g/l همراه با پرولین ۵ گرم در لیتر اضافه نموده تا سوسپانسیون سلولی بتواند سرمای زیاد را تحمل نماید. بعد از این عمل ظروف حامل سلول ها را به مدت یک ساعت در داخل یخ نگهداری نموده وسپس آنها را در داخل ظروف آلومینیومی گذاشته تا به داخل ازت مایع انتقال داده شود. جهت انتقال به داخل تانک ازت مایع ابتدا به مدت ۳۵ دقیقه در دمای منهای ۳۵oC نگهداری و بعد از آن در مافوق سرما (-۱۹۶oc) به مدت دوازده ماه نگهداری گردید. بعد از یک سال ظروف از ازت مایع بیرون آورده شد و بلافاصله در داخل آب گرم سترون ۴۵oc برای مدت یک تا دو دقیقه نگهداری شد. بعد از اینکه سلول ها از یخ زدگی به حالت اولیه برگشت مواد اضافه شده با پیپت جدا شده و سلول ها بر روی محیط کشت نیمه جامد R2 و AA2 که روی آن دو فیلتر از نوع واتمن گذاشته شده بود، کشت گردید و در دمای ۲۶ ± ۱oc و در تاریکی نگهداری شد. نتیجه این مطالعه نشان داد که بعد از دوازده ماه نگهداری سلول ها در مافوق سرما مجددا برای همه رقم ها سوسپانسیون سلولی تشکیل شد. سوسپانسیون سلولی تشکیل شده برای تولید پروتوپلاست استفاده گردید. ارقام آمل -۳ و طارم در مقایسه با شاهد تقریبا دو برابر افزایش تولید پروپلاست داشته ولی رقم خزر در مقایسه با شاهد %۲۰ افزایش داشته است. همچنین در مقایسه باززایی پروتوپلاستها با پروتوپلاست های شاهد نتایج نشان داد که ارقام آمل -۳ و خزر به طور معنی داری کاهش باززایی داشته اما برای رقم طارم در مقایسه با شاهد اختلاف معنی داری مشاهده نشده است. در این آزمایش به ترتیب برای ارقام آمل -۳ ، خزر و طارم تعداد ۳۲, ۲۴ و ۴۹ گیاه سبز به دست آمده است.

کلید واژه: باززایی، برنج، پروپلاست، ذخیره سازی طولانی، ژرم پلاسم، سوسپانسیون سلولی، مافوق سرما