تهیه و خالص سازی آنتی بادی پلی کلونال بر علیه انسولین انسانی

توجه : به همراه فایل word این محصول فایل پاورپوینت (PowerPoint) و اسلاید های آن به صورت هدیه ارائه خواهد شد

 تهیه و خالص سازی آنتی بادی پلی کلونال بر علیه انسولین انسانی دارای ۱۷ صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است

فایل ورد تهیه و خالص سازی آنتی بادی پلی کلونال بر علیه انسولین انسانی  کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه  و مراکز دولتی می باشد.

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی تهیه و خالص سازی آنتی بادی پلی کلونال بر علیه انسولین انسانی،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد

بخشی از متن تهیه و خالص سازی آنتی بادی پلی کلونال بر علیه انسولین انسانی :

نام کنفرانس، همایش یا نشریه : فصلنامه دانشگاه علوم پزشکی سبزوار (اسرار)

تعداد صفحات :۱۷

هورمون انسولین پلی پپتیدی است دو زنجیره ای با وزن مولکولی ۵.۷ کیلودالتون و دارای ۵۱ اسید آمینه می باشد. این دو زنجیره توسط پیوندهای دی سولفیدی به یکدیگر متصل می شوند. یکی از مهمترین بیماری های مرتبط با انسولین بیماری دیابت می باشد که در آن سلول ها قادر به جذب گلوکز نبوده و میزان گلوکز خون افزایش یافته و بافت های بدن با کمبود انرژی مواجه می شوند. این عمل باعث ایجاد عوارض حاد و دیررس متعددی می گردد. در حال حاضر جهت اندازه گیری این هورمون از روش RLA استفاده می شود که این کیت ها نیز از خارج وارد می شود. هدف از این تحقیق، در نهایت طراحی کیت الیزا جهت اندازه گیری انسولین می باشد. اولین گام جهت طراحی این کیت نیز تهیه و تخلیص آنتی انسولین انسانی است. که طی مراحل زیر انجام گرفت. جهت تولید آنتی بادی از خوکچه های هندی به عنوان میزبان استفاده شد. پس از ایمونیزاسیون این حیوانات با انسولین نو ترکیب انسانی به همراه ادجوانت، از آنها خونگیری به عمل آمد و سرم آنها نیز جداسازی گردید. جهت ارزیابی و تشخیص آنتی انسولین تولید شده در حیوان از سه روش RIA, Dot blot وDID استفاده شد. پس از اطمینان از وجود آنتی انسولین در سرم، توسط دو مرحله تخلیص یعنی سولفات آمونیوم اشباع و کروماتوگرافی تعویض یونی، مولکول های IgG جداسازی و تخلیص گردید. جهت ارزیابی میزان خلوص آنتی بادی از تکنیک SDS – PAGE استفاده شد. در نهایت جهت اطمینان از عدم وجود باندهای غیر اختصاصی از تکنیک وسترن بلات استفاده شد که آنتی بادی های خالص شده از درجه خلوص بالایی برخوردار بود و باندهای غیراختصاصی مشاهده نشد.

کلید واژه: انسولین، دیابت، خوکچه هندی، آنتی انسولین، کروماتوگرافی تعویض یونی، SDS- PAGE، DID,Blot