تخلیص و تعیین خصوصیات اینترلوکین ۴ نوترکیب و آنتی بادی ضداینترلوکین ۴ به ترتیب از رده سلولی CHO انتقال یافته با ژن اینترلوکین ۴ و هیبریدومای ترشح کننده آنتی بادی ضد آن

توجه : به همراه فایل word این محصول فایل پاورپوینت (PowerPoint) و اسلاید های آن به صورت هدیه ارائه خواهد شد

 تخلیص و تعیین خصوصیات اینترلوکین ۴ نوترکیب و آنتی بادی ضداینترلوکین ۴ به ترتیب از رده سلولی CHO انتقال یافته با ژن اینترلوکین ۴ و هیبریدومای ترشح کننده آنتی بادی ضد آن دارای ۱۰ صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است

فایل ورد تخلیص و تعیین خصوصیات اینترلوکین ۴ نوترکیب و آنتی بادی ضداینترلوکین ۴ به ترتیب از رده سلولی CHO انتقال یافته با ژن اینترلوکین ۴ و هیبریدومای ترشح کننده آنتی بادی ضد آن  کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه  و مراکز دولتی می باشد.

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی تخلیص و تعیین خصوصیات اینترلوکین ۴ نوترکیب و آنتی بادی ضداینترلوکین ۴ به ترتیب از رده سلولی CHO انتقال یافته با ژن اینترلوکین ۴ و هیبریدومای ترشح کننده آنتی بادی ضد آن،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد

بخشی از متن تخلیص و تعیین خصوصیات اینترلوکین ۴ نوترکیب و آنتی بادی ضداینترلوکین ۴ به ترتیب از رده سلولی CHO انتقال یافته با ژن اینترلوکین ۴ و هیبریدومای ترشح کننده آنتی بادی ضد آن :

نام کنفرانس، همایش یا نشریه : مجله علوم پایه پزشکی ایران

تعداد صفحات :۱۰

اینترلوکین۴ (IL-4)سایتوکاینی با فعالیت پلئوتروپیک بوده و عمدتا توسط لنفوسیتهای T کمک کننده (T helper lymphocyte) سنتز میشود. از جمله مهمترین اثرات آن بر سلولهای مختلف میتوان از القای لنفوسیتهای B انسان در جهت تولید IgEو IgG4 و افزایش مولکولهای سطحی سلول از جمله MHC بر روی لنفوسیتهای B و ماکروفاژها نام برد که این پدیده منجربه افزایش ظرفیت عرضه آنتی ژن در آنها می شود. IL-4 همچنین به عنوان یک فاکتور رشد لنفوسیتهای T به تنهایی و یا با دیگر ستیوکاین ها مانند IL-2 در رشد و نگهداری رده های سلولهای لنفوسیتی T در کشت سلولی کاربرد قابل توجهی دارد. منبع تهیه اولیه این سایتوکاین لنفوسیتهای T تحریک شده میباشد. تحقیقات متعددی در مورد استخراج ژن IL-4 و بیانcDNA در سیستمهای بیان ژنی مختلفی از قبیل E.coli، مخمر و اخیرا سلول پستانداران انجام پذیرفته است و در نتیجه با تکثیر هر کدام از این سیستمهای بیان میتوان سایتوکاین نوترکیب مورد نظر را به دست آورد. استخراج و تعیین مشخصات اینترلوکین ۴ انسانی توترکیب که در رده سلولی CHO بیان شده باشد، تا کنون گزارش نشده است. لذا در این تحقیق سعی شده تا با استفاده از سلول پستانداران (CHO) حاوی ژن IL-4 (به عنوان سیستم بیان) و رشد آن در in vitro، IL-4انسانی نوترکیب و تهیه و پس از خالص سازی، تعیین خصوصیت گردد. سیستم بیان مورد استفاده در این مطالعه، سلول تخمدان هامستر چینی (Chines Hamster) بود که با استفاده از cDNA ژن hIL-4 به داخل آن ترانسفکت شده بود. همچنین برای تهیه آنتی بادی نیز از سلول هیبریدومای ترشح کننده آنتی بادی ضد IL-4 استفاده شد. پس از کشت این سلولها، آنتی بادی ضد IL-4 از محلول رویی کشت هیبریدوما به وسیله پروتیین A خالص و به ژل فعال شده سفاروز متصل گردید و ژل کروماتوگرافی میل ترکیبی ساخته شد. سپس کارآیی روش کروماتوگرافی میل ترکیبی برای جداسازی IL-4 نوترکیب از رویین کشت حاوی پروتیینهای مختلف مورد ارزیابی قرار گرفت. از این ستون کروماتوگرافی با میل ترکیبی و دارای لیگاند آنتی IL-4 جهت خالص سازی rhIL-4 استفاده شد. برای بررسی خلوص و شناسایی IL-4 نوترکیب به دست آمده از روش SDS-PAGE و وسترن بلاتینگ استفاده شد. در SDS-PAGE نمونه خالص شده باندی با وزن مولکولی حدود ۲۷ کیلو دالتون را نشان داد. سپس با انتقال این باند به کاغذ نیتروسلولز و با استفاده از آنتی بادی ضد IL-4 و کونژوگه Anti-mouose متصل به HRP آزمایش وسترن بلاتینگ انجام شد. این آزمایش حضور rIL-4 در باند خالص شده را تایید می کند.

کلید واژه: اینترلوکین ۴، رده سلولی T، سلول CHO، هیبریدوما