مقاله خواص فیزیکی و شیمیایی نو کلئیک اسیدها

توجه : به همراه فایل word این محصول فایل پاورپوینت (PowerPoint) و اسلاید های آن به صورت هدیه ارائه خواهد شد

  مقاله خواص فیزیکی و شیمیایی نو کلئیک اسیدها دارای ۵۵ صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است

فایل ورد مقاله خواص فیزیکی و شیمیایی نو کلئیک اسیدها  کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه  و مراکز دولتی می باشد.

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی مقاله خواص فیزیکی و شیمیایی نو کلئیک اسیدها،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد

---

بخشی از متن مقاله خواص فیزیکی و شیمیایی نو کلئیک اسیدها :

خواص فیزیکی و شیمیایی نو کلئیک اسیدها

نکات کلیدی
پایداری نوکلئیک اسیدها : اگر به نظر میرسد که ساختار رشته های دوبل DNA و RNA بوسیله پیوند هیدروژنی محکم میگردند ، اما این چنین نیست با ندهای هیدروژنی بای جفت شدن بزها مخصوص هستند ، اما پایداری مار پیچ نوکلئیک اسید نتیجه اثر متقابل آب گریزی و دو قطبی ـ دو قطبی بین جفت بازهای آلی میباشد .

اثر اسید : وضعیت بسیار اسیدی ممکن است باعث تجزیه نوکلئیک اسیها به اجزایشان شود : بازها قند و فسفات اسیدهای ضعیف سبب هیدرولیز پیوند بازهای پودینی گلیکوزیلی تا اسید بدون پودین بدست آید شرایط شیمیایی پیچیده برای انتقال بازهای ویژه توسعه داده شده است و اساس توالی شیمیایی DNA است .
اثر قلیا : PH بالا DNA و RNA را تخریب میکند بوسیله تغییر در وضعیت تاتو مری بارها و قطع بازهای هیدروژنی ویژه RNA همچننی مشکوک به هیدرولیز در PH بالا بوسیله شرکت در OM-Z در فرایند شکستگی درون مولکولی ستون فقودی استر میباشد .
بعضی از ترکیبات شیمیایی مانند دوره و فرمامید میتوانند DNA و RNA را در RM طبیعی بوسیل قطع نیروی آب گریزی بین بازهای آلی تخریب کنند .

چسبندگی : DNA خیلی دراز و نازک است و محلولهای DNA یک چسبندگی بالایی دارند مولکوهای DNA دراز مستعد شکستگی در یک محلول از طریق لرزش میباشند این پروسه ها میتوانند برای تولید DNA با یک طول متوسط و مشخص استفادع شود .

چگالی شناوری :
DNA دارای چگالی حدود میباشد و میتواند آنالیز شود خالص شود بوسیله قابلیتش در متعادل کردن در چکالی شناوری اش در یک شیب چگالی کلراید سندیم تشکیل شده در یک سانتریفوژ چگالی دقیق DNA بعلت وجود G+C میباشد و این تکنیک ممکن برای تجزیه DNA های ترکیبات مختلف استفاده شود

موضوعات مرتبط :

ساختار نوکلئیک اسیدها
ویژگیهای دمایی و اسپکتروسکوبی نوکلئیک اسدیها
پایداری نوکلئیک اسیدها : در اولین نگاه ممکن است بنظر میردس که مارپی

چ دو گانه DNA و ساختار ثانویه RNA بوسیله باندهای هیدروژنی بین جفت بازها محکم میگردند .
در حقیقت اینطور نیست مانند پروتئینها ( موضوع A4 را ببینید ) حضور باندهای هیدروژنی بین یک ساختار بطور نرمال ایجاد پایداری نمیکند این بخاطر اینست که یکی باید بررسی شود اختلاف در انرژی بین انها ، در مورد DNA وضعیت تک رشته ای پیچ خورده و ساختار دو رشته ای توجه داشت باندهای هیدروژنی بین جفت بازها در DNA دو رشته ای صرفاً جایگزین میشد از نظر قدرت و انرژی که اگر مولکول DNAتک رشته می بود در محلول آبی ، فقط با مولکولهای آب برقرار میگردد پیوند

هیدروژنی یقیناً در شرایط مورد نیاز برای جفت شدن بازها در یک زنجیریه دوتایی دخالت دارد
DNA دو رشته ای فقط موقعی تشکیل خواهند شد که مکمل یکدیگر باشند اما این پیوند در پایدار بودن مارپیچ شرکت نمی کنند ریشه این پایداری در جای دیگری نهفته است مهمترین مسئله بین جفت بازهای آلی تداخل میباشد از آنجائیکه آن بهتر است که از نظر انرژی آب را به روش متراکم مردن آن از محیط زوجهای آب گریز دور کرد مقدار زیادی از آب در شبکه پیوندهای هیدروژنی وارد

میشودد تد اخل عمل بین دوقطبی های باردار موجود روی بازها را بیشتر میکنئ حتی در DNA تک رشته ای بازها تمایل دارند تا رروی همدیگر متراکم شوند این تراکم شدن ، در زنجیره دوتایی DNA بیشتر میگردد . پدیده آب گریزی باعث میشود که این حالت بهترین حالت از نظر انرژی زایی باشد .
اثر اسید :
در اسیدهای قوی و دمای بالا بعنوان مثال در اسید کلریک در دمای بیش از ۱۰۰ درجه سانتی گراد ، اسید نوکلئیک بطور کامل به ا جزایش تفکیک میشود بازها ، ریبوز ، دی اکسید ریبوز و فسفات درحضور اسیدهای معدنی رقیق تر به عنوان مثال به PH=3-4 ، باندهای راحت تجزیه میشوند به طور انتخاب می شکنند این پیوندها آن پیوندهای گلیکوزیلی هستند که بازهای پورین را به حلقه قندریبوز متصل میکنند و با شکستن آنها اسید نوکلئیک به صورت بدون پودین میشود روشهای شیمیایی پیچیده تری به دست آمده ا ند که بطور ویژه بازها را در بر دارند این شکل اساس توالی شیمیایی در DNA است که توسط ماکسیم و گیلبرت ارائه شد .

اثر قلیا بر DNA :
افزایش PH بالای دامنه فیزیو لوژیکی (PH=7-8) اثرات دقیق بیشتر روی ساختار DNA دارد . اثر قلیا تغییر دادن وضعیت توتومریک بازها است این اثر میتواند با مراجعه به مدل ترکیب سیکلو هگزان مشاهده شود مولکول در تعادل است بین وضعیت توتومریک کتو و انول میباشد در PH طبیعی ، ترکیب عمدتاً در حالت keto میباشد افزایش PH سبب میشود تغییر به تشکیل اینولات میگردد که مولکول پروتون از دست میدهد زیرا بار منفی با پایداری بیشتی بر روی اتم اکسیژن الکترونگاتیو

مطابقت دارد ساختار گوانین نیز تمایل پیدا میکند به تشکیل اینولات در PH بالا و تغییرات شبیه نیز در ساختار بازای دیگر روی میدهد این اثرات باند هیدروژنی بین جفت بازها را تحت تاثیر قرار میدهد ونتیجه آن اینست که ساختار دو رشته ای DNA بشکند واین است که DNA واسرشت میگردد .

RNA :
در RNA هم واسرشت مشایه در مناطقی از مارپیچ در PH بالا صورت میگیرد اما این اثر تحت تاثیر حساس بودن RNA برای هیدرولیز در محیط قلیایی است

شکل ۳۸

واسرشت شدن DNAدر محیط با PH بالا
این مسئله است بخاطر اینکه گروه در RNA وجود دارد که دقیقاً در جایی قرار گرفته در شکستن ستون RNA از طریق اعمال نیروی درون مولکلی بر روی فسفات در محل اتصال فسفودی استر دخالت میکند این مسئله بیشتر پیشرف

ت میکند در شرایط با PH بالا ویرا –OH بعنوان یک باز عمومی عمل میکند .
محصول آن ایجاد آزاد و و فسفودی استر حلقوی اس که بعداً به یا مونو فسفات هیدرولیز میشود حتی در PH طبیعی هم RNA نسبت به DNA برای هیدرولیز شدن مستعد تر است که DNA البته فاقد است این مسئله پذیرفتی است که چرا DNA بازشده تا با دی اکسی ریبوز ترکیب شود چون کاربری آن به پایداری بالای انرژی احتیاج دارد .

شکل ص ۳۸

شکسته شدن درون مولکولی پیوندهای فسفودی استر در محیط قلیایی

واسرشت شیمیایی :
تعدادی از عوامل شیمیایی میتوانند سبب واسرشت DNA یا RNA در محیط طبیعی شوند بهترین مثال این ترکیبات اوره و فرمامید میباشد غلظت بالایی این عوامل ( چندین مولا ر) باعث تخریب باندهای هیدروژنی در محلول آبی متراکم میگردد معنی آن اینست که پایداری انرژی در ساختار ثانوی اسید نوکلئیک ازطر یق خارج کردن آب در بین پیوندهای آب گریز باز صورت گرفته ضعیف میشود و پیوندهای مستمر واسرشت شدن میشوند .

چسبندگی :
ی DNA سلولی خیلی دراز و باریک است و از نظر فنی نسبت به طولی زیادی دارد DNA حدود دو نانومتر قطر دارد و ممکن است در حدود میکرومر یا میلی متر یا ؟ مثل کرموزومهای یوکاریونی چند سانتی متر باشد برای دید بهتر ، اگر DNA قطری شبیه ماکارونی داشته باشد در آن صورت کروموزوم Ecoli ، دارای ۶/۴ میلیون زوج باز طولی برابر ۱ کیلومتر دارد بعلاوه DNA یک مولکول محکمی است سختی آن میتواند شبیه به ماکارونی نیم پخت باشد بهمین علت است که

محلولهای DNA چسبندگی زیادی دارند بعلاوه مولکولهای بلند DNA میتوانند به راحتی با نیروی حرکتی آسیب ببینند یا با استفاده از ولتراموند با توان بالا ، که در نهایت غلظت محیط کم میشود حساسیت نسبت به لرزش مشکل ساز میشود اگر بخواهید مولکولهای بلند DNA را به صورت دست نخورده جداکنیم اگر چه باید از لرزشهای صسورت برای تولید DNA با طول متوسط و مشخثث استفاده کرد توجه کنید که لرزش و صوت هیچ کدام DNA دارد ناتوره نمی کند آنها فقط طول مولکول دو رشته ای DNA را در محلول کوتاه میکنند .

چگالی شناوری :
تجزیه و خالص سازی DNA میتواند مطابق با چگالی آن انجا م گیرد در محلولهای با غلظت بالا از نمکی باوزن مولکولی زیاد دارند برای مثال هشت مول کلرید سدیم ، DNA چگالی مشابه با توده محلول معینی حدد ۱۰۷ گرم دارد اگر محلول در با سرعت بالا سانتریفوژ کینیم ، محلول غلیط سدیم گرایش درد که به انتهای لوله برود و یک شیب چگالی ایجاد کند ( شکل ۳) درنهایت DNA موجود در محلول یک نوار معینی را در نزدیک محل رسوب سزیم ایجاد میکند که این نوار به خاطر چگالی

شناوری خاص DNA میباشد این روش سانتریفوژ تعادتی براساس شیب چگالی یا سانتریفوژ ایزو پیکینک می گویند از آنجائیکه تحت این وضعیت ذرات RNA در ته ظرف رسوب میکنند این میتواند روش مناسبی برای خالص سازی DNA از این دو ترکیب باشد این روش از نظر تجزیه و تحلیل هم تاثیر دارد زیرا که چگالی شناوری DNA (‌p) رابطه خطی ای از میزان G+C موجود در مولکول است

P=1066+0/098%(G+C)

بنابراین رسوب DNA میتواند استفاده شود برای تخمین محتوای G+C و یادر بعضی موارد قطعات DNA با محتوی G+C مختلف از کلروپلاستها مولکول میتواند جداشود .
Q4 : کنترلهای ترجمه و رویدادهای پساز ترجمه

نکات کلیدی
کنترل ترجمه :
در پزوکاریوتها سطح ترجمه سیترونها مختلف میتواند موثر واقع شو بوسیله ( ۱) اتصال مولکولهای کوتاه آنتی سنس ( ۲) ثبات نسبی با نوکلئازهای قسمتهایی از RNA پلی سیترونی و( ۳) باندهای پروتئینی که ممانعت میکنند از دسترسی ریبوزوم تحت تاثیر قرار گیرد در یوکاریتها باندهای پروتئینی میتوانند نیز با پوشش Mrna از ترجمه مانه شوند و تکرار هایی از توالی را بی ثبات کنند و ترجمه Mrna را کمتر کنند .

پلی پروتئینها :
یک محصول ترجمه منفرد به نام پلی پروتئین شکافته میشود برای تولید دو یا چند پروتئی جدا بسیاری از ویروسها پلی پروتئینها را تولید میکنند

هدف گیری پروتئین :
نوالیهای لیپیدی کوتاه ویژه ای در پروتئین تعیین میکند مکان سلولی پروتئین را مانند هسته ، میتوکندری ، یا کلروپلاست توالی نشانه پروتئینخا ترشحی موجب اتثال ریبوزوم در حال ترجمه به عواملی میشود که این عوام در اتصال ریبوزوم به غشا نقش دارند و پروتئین در حال سنتز منتقل میشود از مسان غشاء معمولاً توالی نشانه جدا میشود بوسیله نشانه پپتیدلاز .

تغییر پروتئین :
بیشترین تغییرات عادی برای پلی لیپیتدهای جدید جداشدگی و تغییرات شیمیایی هستند شکاف اتفاق می افتد برای انتقال پتیدهای نشانه برای رها سازی قطعات بالغ از پلی پروتئینها برداشت لیپیتدهای داخلی و آرایش پایانه های N و C وجود دارند تغییرات شیمیایی که میتوانند برروی کلی پروتئینها اتفاق می افتد به جزء شش زنجیره جانبی آمینو اسید اغلب فستوریلاسیون فعالیت پروتئین را کنترل میکند

تخریب پروتئین :
پروتئینها یآسیب دیده تغییر یافته ناپایدار به طور ذاتی با وجود مولکولهای چندتایی یوبی کوئیتین به طور کووالانسی به پرتئینها متصل شده اند برای تخریب مشخص میشوند پروتئین یوبی کوئیتن بعداً تخریب میشود بوسیله یک کمپلکس پروتئاز ۲۶S .

موضوعت مرتبط :
ژنهای راه اندازها و افزایش دهنده ها ( m4(
پردازش mRNA، hbRNPS و snRNPs

کنترل ترجمه :
بخا طر ماهیت مختلف mRNA در پروکاریوتها و یوکاریوتها و فقدان پوشش هتسه ای در پروکاریوتها امکانات مختلف وجود دارند برای کنترل ترجمه در پروکاریوتها ساختار تشکیل شده بوسیله نواحی mRNA جایگاههای اتصال ریبوزم را مبهم میکنند بنابراین ترجمه بعضی از سیترونها نسبت به دیگران کاهش می یابد حضور کیپهای چندتایی از معمولاً در ناحیه بدون کلرون ، mRNA را برای تخریب

سریع معین میکند نوع دیگری از کنترل ترجمه اتصال مستقیم پروتئینهاا به mRNA و در نتیجه جلوگیری از ترجمه است این RNA ، mRNA پو شیده نام دارد در وضعیتهای مناسب mRNA میتواند با جداشدن پروتئین mRNA میتواند ترجمه شود برخی توالیهای بدون رمز میتواند موجب شود mRNA در قسمت مخصوصی باعث قرار گرفتن آن در سیتوپلاسم شود و قتی ترجمه میتواند شیبی از غلظت پروتئین را در درون سلول ایجاد میکند .

پلی پروتئینها :
با کتریوفاژ و نسخه های ویروسی وخیلی از mRNA ها برای هورمونها در یوکاریوتها ترجمه میشوند به صورت زنجیره پلیس پپتیدی که بعد بوسیله پروتئازهای ویژه برای تولید پروتئینهای بالغ چند تایی از یک محصول ترجمه جدا میشوند پلی پپپتید پلی پروتئین نامیده میشود

هدف گیری پروتئین :
مشخص شده ایت که مکانهایی پروتئین ها در سلول اغلب تعیین میشوند بوسیله آمینو اسیدهای ویژه نسبتاً کوتاه در داخل خود پروتئینها این توالیها میتوانند پاسخگو باشند برای ترشح پروتئینها یا هدف گیری آنها برای اندامک های دیگر هستند پیچیدگی زیاد سلول یوکاریوتی به معنی اینست که انواه مختلفی وجود دارند در هدف گیری یوکاریوتها ترسح پروتئین در پروکاریوتها ویوکاریوت ها با دخالت میکن یک توالی نشانه در پروتئین نوکلئیک پدید و پروتئینهای ویژه صورت میگیرد و شناسایی پروتئین های ویژه با یک ذره RNP ذره شناسایی نشانه SRP انجام میشود .

اگر یک ریبوزوم سیتورولی ترجمه mRNA مربوط به یک پروتئین ترشحی را آغاز کند ، باندهای SRP به ریبوزوم و پلی پپتید خارج شده متصل شده و ترجمه را جلوگیری میکند SRP قادر است ریبوزومها را با یک زنجیره نوکلئیک پدید دارای توالی نشانه شناسایی کند که تشکیل مشود از حدود ۱۳-۳۶ آمینو اسید که دارای حداقل یک آمینو اسید با بار مثبت است که با یک هسته آب گریز تشکبل شده اند ۱۰-۱۵آمینو اسید دنبال میشود و به یک آمینو اسید گوچک خنثی اغلب آلانین متصل است.

شکل ۲۶۳

دیگر پپتیدهای توالی دارد در پروتئین ها مسئول مکان یابی سلولی آنها هستند توالیهای مختلف پایانه N باعث ورود پروتئین ها به میتوکندری ها یا کلروپلاستها میشوند و توالی داخلی LYS-LYS-LTS-ARG-LYS یا هر پنج آمینو اسید مثبت متوالی میتواند یک نشانه جاگیری هسته ای باشد که باعث ورود پروتئین به درون هسته میشود

تغییر پروتئین :
یک پلی پپتید تازه ترجمه شده ، همیشه نمیتواند فوراً یک پروتئین کاربردی را تولید کند .
جدا از تاخوردگی صحیح و امکان تشکیل شدن پیوندهای دی سولفید ، وجود دارند تعدادی از تغییرات دیگر برای فعالیت . این تغییرات شاکل شکافتگی و. تغییرات کووالانسی مختلف است شکفتگی خیلی معمول است خصوصاً آرایش با آمینو یا کربوکسی پپتیداز ها . اما انتقال پپتیدهای داخلی در انسولین اتفاق می افتد تغییرات شیمیایی بسیار زیاد و مختلف هستند و دیده شده است که اتفاق میافتد روی پایانه N و C بر روی زنجیره جانبی آمینو اسیدی به جز

Val,Met,Leu,IleGly,Ala تغیرات شامل استیلاسیون ،‌هیدروکسیلاسیون ،‌فسفریلاسیون ،‌متیلاسیون ، گلیکوز یلاسیون وحتی افزایش نوکلئو تید میباشند هیدروکسیلاسیون پروتئین در کلاژن رایج است و برخی از پروتئین های هیتونی ، اغلب استیله میشوند فعالیت خیلی از آنزیمها نظیر گلیلوژن فسفریلاز و برخی از عوامل رونویسی یه وسیله فسفریلاسیون کنترل میشوند

تخریب پروتئین :
پروتئین مختلف نیمه عمرهای بسیار مختلفی دارند پروتئین های تنظیمی به بازسازی دوره ای سریع گرایش دارند و سلولها باید قادر باشند به مصرف پروتئین های ناقص و آسیب دیده در یوکاریوتها مشخص شده است آمینواسیدهای پایانه N ، که نقش بحرانی در پایداری ذاتی پروتئین بازی میکند هشت آمینو اسید پایانه N( val,thr ,ser, pro,met,gly,cys,ala) با پایداری آن پروتئین همبستگی دارد ( ساعت ) هشت آمینو اسید ( tyr, trp,pho,lys,len,his,arg) با کوتاه ( ۲ تا ۳۰ دقیقه ) و چهار آمینو ا سید ( glu,gln,asp,asn) به دنبال تغییر شیمیایی ، ناپایدار میشوند پروتئین که آسیب دید تغییر یافته یا پروتئین که بطور ذاتی یک پایانه N آمینو اسیدی ناپایدار است با اتصال کووالانسی مولکولهای کوچک ، پروتئین به شدت حفظ میشود .

یوبی کوئیتن از طریق Gly پایانه C یوبی کوئیتین با آمینو اسیدهای لیزین در پروتئین یوبی کوئیتن دار میشود این پروتئین بوسیله یک کمپلکس پروتئاز ۲۶S هضم میشود دراین واکنش ATP مورد نیاز است و یوبی کوئیتن سالم آزاد میشود برای استفاده مجدد .

E3 : رونوشت برداری چرخه سلولی

نکات کلیدی
چرخه سلولی DNA فقط نسخه برداری میشود در هنگام فاز S این بوسیله G1 ادامه می یابد و با G2 میتوز بعد از G2 است ورود به فاز S بوسیله چرخه تنظیم میشود و کنیاز پروتئین فرایند منظم است سلولها میتوانند چرخه سلولی GO آغاز کنند .

مراحل چرخه سلولی :
چهار مرحله اساسی M,G2,S,GL در چرخه سلولی وجود دارد مرحله S مرحله سنتز DNA است ولی مرحله M یا میتوز مرحله تقسیم سلول است این دو مرحله با G1 و G2 جدا میشوند مرحله M میتواند به چهار مرحله پروفاز ، متافاز ، آنافاز و تلوفاز تقسیم شود G2,S,G1 مرحله انتر فاز را تشکیل میدهند سلولها میتوانند وارد شوند به یک مرحله غیر تقسیم از G1 بنام G0 یا آرامش .

نقاط کنترل و تنظیم آنها :
چرخه سلولی در پاسخ به محیط سلول به منظور جلوگیری از تکثیر سلولهای آسیب دیده تنظیم میشود نقاط تنظیمی مراحلی هستند که اگر شرایط برای تقسیم سلولی مناسب نباشد ، چرخه سلولی در آنها متوقف میشود نقاط تنظیم اصلی در انتهای مراحل G1 و G2 اتفاق می افتند .
درنقطه R در مرحله G1 سلولهای بدون متیوژنها از چرخه سلولی خارج و وارد مرحله استراحت G0 میشوند

سیکلین ها و کینادهای وابسته به سیکلین :
چرخه سلولی از طریق فسفریلاسیون پروتئین ها کنترل میشود که بوسیله کمپلکسهای پروتئین کیناز چند تایی کاتالیز میشوند کمپلکسهای CDK سیکلین مراحل مختلف چرخه سلولی کنترل میکنند فعالیتشان از طریق کنترل رونویسی سنتز آنها تنظیم میشود و تفسیر فعالیت آنزیمی آنها نیز بوسیله پروتئینهای فعال کننده و با تنظیم تخریب آنها تنظیم میگردد

نظیم بوسیلهE2F و Rb :
پیشرفت G1 بوسیل فعال سازی عامل رونویسی E2F کنترل میشود که این عامل بیان ژنهای لازم را برای مراحل بعدی چرخه سلول را تنظیم میکنند

فعال سازی چرخه سلولی آن و مهار آن و سرطانی شدن
رده هایی از پروتئین های SIP و INK4 پیشرفت چرخه سلولی را با مهار فعالیت کمپلکسهای CDK سیلیکن متوقف میکنند

مراحل چرخه سلولی :
از آنجایی فرایندهای تنه سازی DNAو تقسیم سلول در فواصل زمانی مشخص و تنظیم شده و اقع میشوند چرخه سلولی چهار مرحله است :
G1 : طولانی ترین مرحله است که سلول برای همانند سازی DNAآماده میشود
S : تنها دوره در چرخه سلول در مدتی که DNA همانند سازی میکند .
G2: یک مرحله تاخیری کوتاه قبل از میتوز
M : یا میتوز ( جداسازی کروموزمهای خواهری ) و تقسیم سلول
G1 ، S و G2 مرحله اینترفاز را تشکیل میدهند میتوز میتواند به مراحل پروفاز

مدتی که کروموزمها متراکم میشوند متافاز مدتی که کروماتیدهای خواهری در ناحیه سانترومر متصل شده اند درنهایت آنافاز که در این مرحله کروماتیدهای خواهری جداشده وبه قطبین و ؟؟ کقابل حرکت میکنند و به صورت سلولهای دختر جدا میشوند ر تلوفاز پوشش های هسته ای اطراف کروموزمهای هر قطب را می پوشاند و دوهسته تشکیل میشود

نقاط کنترل و تنظیم آنها :
شروع یک چرخه تقسیم سلولی به وجود عاملهای رش بیرون سلولی نیازمنداست در فقدان میتوژن ها ، سلولها از چرخه سلول در مرحله G1 خارج و به مرحله استراحت G0 وارد میشوند سلولهایی که بعد از گذشتن از نقطه محدود کننده از میتوژنه محروم مانده اند برای تکمیل تقسیم سلول قبل از ورود به مرحله G0 به چرخه سلولی ادامه میدهند به طور مشخص نقطه محدود کنند
از اهمیت محکمی در دوک سلولها برخوردار است برای تحمل یک چرخه تقسیم سلولی
G1فاصله ای در میان میتوز و نقطه محدود کننده است .
بخشهایی از چرخه سلولی مانند نقطه محدود کننده که فرایند در آنجا متوقف میشود به عنوان نقاط کنترل مینامند این نقاط در مرحله های تاخیر به کار میروند .

سیکلین ها و کنیاز های وابستهبه سیکلین ها :
مکانیزمی ا صلی برای پیشرفت چرخه سلولی تنظیم فسفریلاسیون پروتئین هاست این عمنل بوسیله پروتئین کنیاز های ویژه کنترل میشود که از یک زیر واحد تنظیم کننده و یک زیر واحد کاتالیتک

ساخته شده اند زیر واحدهای تنظیم کننده سیکلین ها نام دارند وزیر واحدهای کاتالیتک کنیاز های وابسته به سیکلین ( CDKS) نام دارند سه گروه متفاوت کمپلکس CDK سیکلین وجود دارد که با هر یک از مراحل G1 ، S یا M چرخه سلولی درارتباط هستند کمپلکسهای G1CDK سلول را برای ورود به مساله S با فعال کرد عوامل رونویسی آمناده میکنند
عوامل رونویسی موجب رونویسی و بیان آنزیمهای مورد نیاز برای سنتز DNAو ژنهای رمز کننده کمپلکس ه ای CDK مرحله S را موجب میشوند این کمپلکس ها این اطمینان را ایجاد میکنند که هر کرموزوم فقط یک بار رونویسی شود .

فعالیت کمپلکس های CDK در سه مرحله تنظیم میشود :
۱- با منترل رونویسی زیر واحدهای کمپلکس CDK
۲- با کنترل ممانعت کننده هایی که فعالیت کمپلکسهای CDK را کاهش میدهند
۳- با پروتئولیز کردن سازمان یافته کمپلکسهای CDK در مرحله معینی از چرخه سلولی زمانی که این کمپلکسها به مدت طولانی تری نیازمند

تنظیم بوسیله E2F و Rb
پیشرفت چرخ سلولی از G1 به مرحله S در یک قیمت با فعالیت تنظیم شده رونویسی ژنهاست و. به نظر میرسد که پیشر فت مراحل بعد چرخه سلول به وسیله مکانیزمهای پس رونویسی تنظیم شود E2F رونویسی وبیان ژنهای رمز کننده پروتئین های مورد نیاز برای همانند سازی DNA وسنتز دی اکسی ریبو نوکلئوتیدها وبرای سیکلین ها و CDK های مورد نیاز در مراحل بعدی چرخه سلولی را تحریک میکند هنگامی که Rb هیپوفسفریله میشود فعالیت E2F ممانعت میشود فسفریلاسیون Rb به وسیله کمپلکسهای CDK سیکلین در طی مرحله میانی و پایانی G1 ، E2F را آزاد میکند که میتواند رونویسی را فعال سازد
H1 : طراحی ناقلین پلاسمیری

نکات کلیدی
محصولات اتصال : یکی از بهترین قدمها در پرورش لکونینگ تشخیص داد بین مولکولهای ناقل تولید شده و پلاسمیدهای نوترکیب است تعدادی از روشها برای تسریع این فرایند توسعه یافته اند.
مقاومت دوتایی بر آنتی بیوتیک : یک ناقل با ژنهای مقاوم آنتی بیوتیک میتوانند برای غربال برای نوترکیبها استفاده شوند اگر قطعه هدف به داخل یکی از ژنها وارد شود بنابراین آن را به طور اتفاقی غیر فعال کند
غربالگیری آبی ـ سفید : غیر فعال کردن ژن Lacz روی پلاسمید میتواند برای غربال برای نوترکیبها روی پلات شامل IPTG و ژن X استفاده شود .
ژل x به محلول آبی تبدیل میشود اگر ژن Lacz دست نحورده بوده وبوسیله IPIG القاء شود و ازاین رو نوترکیبها به صورت کلنی های سفید میرویند .

مکانهای کلوئینگ چند تایی :
یک مکان کلوئینگ چندتایی انعطاف پذیری در انتخاب یک آنزیم محدود کننده یا آنزیمهای برای کلوئینگ فراهم می آورد .