مقاله همسانه سازی توالی K2S ژن t-PA در ناقل بیانی جهت بیان در مخمر Pichia Pastoris

توجه : به همراه فایل word این محصول فایل پاورپوینت (PowerPoint) و اسلاید های آن به صورت هدیه ارائه خواهد شد

  مقاله همسانه سازی توالی K2S ژن t-PA در ناقل بیانی جهت بیان در مخمر Pichia Pastoris دارای ۶ صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است

فایل ورد مقاله همسانه سازی توالی K2S ژن t-PA در ناقل بیانی جهت بیان در مخمر Pichia Pastoris  کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه  و مراکز دولتی می باشد.

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی مقاله همسانه سازی توالی K2S ژن t-PA در ناقل بیانی جهت بیان در مخمر Pichia Pastoris،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد

بخشی از متن مقاله همسانه سازی توالی K2S ژن t-PA در ناقل بیانی جهت بیان در مخمر Pichia Pastoris :

تعداد صفحات:۶

چکیده:

پروتئین t-PA(Tissue- type Plasminogen activatior) از مهمترین فعال کننده های پلاسمینوژن در جریان خون است که در درمان آنفارکتوس قلبی و سایر مشکلات ترومبوزی مورد استفاده قرار می گیرد. فاکتور نوترکیب( K25(Reteplase، یک فرم موتانت حذفی از مولکول t-PA انسانی است که به فرم غیر گلیکوزیله و inclusion body با تکنیک مهندسی ژنتیک در E.coli بیان می گردد، به طوریکه جهت استفاده از این پروتئین به صورت فاکتور فعال، به فرایندهای استخراج، خالص سازی، refolding و گلیگوزیلاسیون در شرایط in vitro نیاز است. از آنجا که گلیکوزیلاسیون و فولدینگ صحیح این پروتئین در عملکرد آن بسیار مهم است، تولید نوترکیب آن در سیستم های یوکاریوتی از جمله مخمر گزینه مناسب تری محسب می گردد. مخمر P.Pastoris یکی از میزبان های یوکاریوتی مناسب جهت تولید پروتئین های نوترکیب است که به علت دارا بودن پروموترهای قوی قابل القا نظیر الکل اکسیداز ۱(AOX1)، قابلیت بیان بالا و سریعی از ژن های نوترکیب را دارد. در بررسی حاضر، توالی ژنی K2S، با استفاده از آغازگرهای اختصاصی رفت و برگشتی تکثیر شد. پس از هضم ناقل بیانی اختصاصی pPIC3.5k و محصول PCR توالی K2S با استفاده از آنزیمهای برشی مناسب، هر دو محصول برش خورده در واکنش اتصال شرکت داده شدند و در مرحله بعد، محصول اتصال طی فرایند ترانسفورماسیون به روش شوک حرارتی به سلول های مستعد E.coli انتقال داده شد. در نهایت صحت محصول همسانه سازی شده طی فرایندهای PCR, Colony PCR و هضم آنزیمی تأئید و جهت آنالیز دقیق تر تعیین توالی گردید.