مقاله کآاربرد RT-PCR در تشخیص عفونت پایدار ویروس تب برفکی در گاو

توجه : به همراه فایل word این محصول فایل پاورپوینت (PowerPoint) و اسلاید های آن به صورت هدیه ارائه خواهد شد

  مقاله کآاربرد RT-PCR در تشخیص عفونت پایدار ویروس تب برفکی در گاو دارای ۳ صفحه می باشد و دارای تنظیمات در microsoft word می باشد و آماده پرینت یا چاپ است

فایل ورد مقاله کآاربرد RT-PCR در تشخیص عفونت پایدار ویروس تب برفکی در گاو  کاملا فرمت بندی و تنظیم شده در استاندارد دانشگاه  و مراکز دولتی می باشد.

توجه : در صورت  مشاهده  بهم ریختگی احتمالی در متون زیر ،دلیل ان کپی کردن این مطالب از داخل فایل ورد می باشد و در فایل اصلی مقاله کآاربرد RT-PCR در تشخیص عفونت پایدار ویروس تب برفکی در گاو،به هیچ وجه بهم ریختگی وجود ندارد

بخشی از متن مقاله کآاربرد RT-PCR در تشخیص عفونت پایدار ویروس تب برفکی در گاو :

مقدمه :

ویروس تب برفکی عضوی از جنس آفتوویروس در خانواده پیکورناویریده است و عامل سببی مهمترین بیماری ویروسی حیوانات زوج سم از نظر اقتصادی می باشد. اگرچه میزان مرگ و میر دام های بالغ در تب برفکی معمولا“ پائین می باشد ولی این بیماری موجب آاهش تولیدات دامی می گردد و آشورهای درگیر این بیماری نمی توانند در تجارت بین المللی دام و فرآورده های دامی وارد شوند (۳). عفونت پایدار غیرآشکار یکی از پیامدهای متداول عفونت درمانگاهی و تحت

RNA ویروس تب برفکی در نمونه های جمع آوری شده طی عفونت پایدار به آار گرفته شده است (۴، ۷، ۸). Prato Murphy و همکاران (۱۹۹۴ ) نشان دادند آه RT-PCR بسیار حساس تر از روش استاندارد جداسازی ویروس است و می توان از آن برای تشخیص سریع ویروس تب برفکی در بافت های گاوهای آلوده به عفونت پایدار با این ویروس استفاده نمود (۷). در این مطالعه با هدف تعیین فراوانی حامل های ویروس تب برفکی برای اولین بار در ایران از روش RT-PCR برای شناسائی توالی ژنومی ویروس تب برفکی در گاوهای به ظاهر سالم آشتارشده در آشتارگاه زیاران استفاده شد.

مواد و روش آار :

برای نمونه گیری با برگرداندن سر دام ذبح شده و ایجاد شکاف طولی در سطح داخلی استخوان فک پائین، لوزه آامی به سهولت در دسترس قرار می گرفت. پس از نمونه گیری تلاش می شد نمونه ها در کوتاه ترین زمان ممکن به پژوهشگاه ملی تحقیقات مهندسی ژنتیک و فنآوری زیستی و آزمایشگاه ویروس شناسی دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران رسانده شوند . نمونه ها تا زمان آزمایش در انجماد عمیق نگهداری شدند .

استخراج :RNA

استخراج RNA بر اساس روش گوانیدینیوم- تیوسیانات- فنل- آلروفرم با استفاده از محلول استخراج RNAfast (ساخته شده در پژوهشگاه ملی تحقیقات مهندسی ژنتیک و فنآوری زیستی) انجام شد . RNA محلول بلافاصله در واآنش رونویسی وارونه بکار می رفت یا تا زمان آزمایش در دمای ۷۰- درجه سانتیگراد نگهداری می شد. واآنش RT-PCR به روشی آه پیشتر توسط قرشی و همکاران (۱۳۸۰) گزارش گردیده است انجام شد. اختصاصی بودن این واآنش توسط تعیین توالی نوآلئوتیدی و مقایسه آن با ژنوم ویروس تب برفکی تائید شده است (۱). با استفاده از الکتروفورز در ژل آگارز ۱% وجود یا عدم وجود محصول PCR مورد ارزیابی قرار می گرفت. پس از الکتروفورز، ژل به مدت ۱۰ دقیقه در محفظه حاوی اتیدیوم بروماید µg/ml)4) رنگ آمیزی می شد و در پایان با دستگاه اشعه UV بررسی می شد.